Question

6．牛奶是微生物生長的良好培養(yǎng)基，未經(jīng)消毒處理的牛奶中往往存在多種細(xì)菌，有些細(xì)菌可引起相關(guān)疾病，如具有高度耐鹽性的金黃色葡萄球菌引起人類肺炎、腸炎等疾�。�因此，牛奶在飲用前需對其進行消毒，并對消毒后的牛奶中的細(xì)菌進行檢測，圖為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程．請回答下列問題：

（1）對于生鮮牛奶可用巴氏消毒法進行消毒，使用這種方法的好處是牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞．圖中7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基可為微生物提供的營養(yǎng)成分包括碳源、氮源、水和無機鹽．
（2）為檢測消毒前后牛奶中細(xì)菌含量的變化情況，用無菌吸管從盛牛奶的錐形瓶中吸取1mL生鮮牛奶至盛有9mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復(fù)3次．取最終的牛奶稀釋液0.1mL滴在培養(yǎng)基上進行涂布，培養(yǎng)一段時間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落．若用該方法培養(yǎng)設(shè)置了3個培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為35、33、34，則上述稀釋倍數(shù)合適 （填“合適”或“不合適”），運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值偏�。ㄌ睢捌�大”或“偏小”）．消毒后的牛奶中絕大部分細(xì)菌被殺死，若繼續(xù)用該方法檢測消毒后的牛奶中細(xì)菌的數(shù)量，則在操作步驟上應(yīng)做什么改動？稀釋次數(shù)減少．
（3）金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）土生長時，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色．圖示操作中在血平板上的接種方法是平板劃線法．經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實驗，血平板上菌落周圍均出現(xiàn)，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進行完善．完善的具體方案是設(shè)罝不加鮮牛奶（接種無菌水），其他換作均相同的對照組．

Answer 1

分析 滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對象主要有接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等．消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對象主要有操作空間、某些液體、雙手等．稀釋涂布平板法常用來進行微生物的計數(shù)．

解答 解：（1）常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法．巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞．培養(yǎng)基的基本成分包括碳源、氮源、水和無機鹽．
（2）為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，因此上述稀釋倍數(shù)合適，由于經(jīng)此方法接種培養(yǎng)時當(dāng)兩個或多個菌落重疊在一起時按一個菌落計算，所以運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值偏小．消毒后的牛奶中絕大部分細(xì)菌被殺死，若繼續(xù)用該方法檢測消毒后的牛奶中細(xì)菌的數(shù)量，則在操作步驟上應(yīng)稀釋次數(shù)減少．
（3）分析圖解可知，圖示操作中在血平板上用接種環(huán)接種方法為平板劃線法．經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實驗，血平板上菌落周圍均出現(xiàn)透明圈，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進行完善．完善的具體方案是設(shè)罝不加鮮牛奶（接種無菌水），其他換作均相同的對照組．
故答案為：
（1）牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞    碳源、氮源、水和無機鹽
（2）合適      偏小   稀釋次數(shù)減少
（3）平板劃線法   透明圈   設(shè)罝不加鮮牛奶（接種無菌水），其他換作均相同的對照組

點評 本題主要考查微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識，關(guān)鍵是要求學(xué)生弄清滅菌與消毒的概念、方法、適用對象和微生物的接種與計數(shù)．