Question

大腸桿菌常在生物技術(shù)上被制成“工程菌”．某小組的同學(xué)，利用實驗室的大腸桿菌的品系及其他必要材料，對該品系大腸桿菌進(jìn)行了培養(yǎng)、計數(shù)．請分析回答：
（1）微生物的培養(yǎng)基在制備時防止雜菌污染，常用的無菌技術(shù)包括

 

 兩個方法．
（2）在制備固體培養(yǎng)基的倒平板操作時，平板冷凝后，甲同學(xué)將平板倒置．他這樣做的目的是

 

．
（3）乙同學(xué)采用平板劃線的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選，在每次劃線之前都要灼
燒接種環(huán)，他這樣做的目的是

 

．
（4）丙、丁2位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)．在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中，得到以下2種統(tǒng)計結(jié)果：丙同學(xué)在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為230；丁同學(xué)在該濃度下涂布了3個平板統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為21、212、256，并且取平均值163作為統(tǒng)計結(jié)果；請評價這兩位同學(xué)的實驗結(jié)果的有效性．①丙同學(xué)

 

，原因是

 

．②丁同學(xué)

 

，原因是

 

．
（5）戊同學(xué)在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，但他無法斷定該大腸桿菌的品系被污染了．他的理由是什么？

 

．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),測定某種微生物的數(shù)量

專題：

分析：1、實驗室中目的菌株的篩選
①原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長．
培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源．缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的細(xì)菌才能分解尿素．配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，能夠生長的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌．
2．統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法
（1）稀釋涂布平板法（間接）
①當(dāng)樣品的稀釋庋足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌．
②通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)．
（2）利用顯微鏡直接計數(shù)

解答： 解：（1）常用的無菌技術(shù)包括消毒和滅菌兩個方法．
（2）培養(yǎng)基倒置培養(yǎng)是為了防止水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，可防止培養(yǎng)基表面的水分揮發(fā)，造成污染．
（3）在每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)的目的是殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，以便從上次劃線獲取菌種．
（4）丙同學(xué)實驗操作不合理，原因是只沒有設(shè)置重復(fù)組，結(jié)果不具有說服力；丁同學(xué)也不合理，應(yīng)選擇30-300的菌落數(shù)進(jìn)行計數(shù)，其中1個計數(shù)結(jié)果與另2個相差太遠(yuǎn)．
（5）在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，由于雜菌可能來自培養(yǎng)基或來自培養(yǎng)過程，故無法斷定該大腸桿菌的品系被污染了．
故答案為：
（1）消毒和滅菌
（2）皿蓋上會凝有水珠，防止水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，可防止培養(yǎng)基表面的水分揮發(fā)
（3）殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種
（4）①不合理；沒有設(shè)置重復(fù)組，結(jié)果不具有說服力    ②不合理； 1個計數(shù)結(jié)果與另2個相差太遠(yuǎn)（或在操作過程中可能出現(xiàn)錯誤，或只簡單地計算了平均值）
（5）因為雜菌可能來自培養(yǎng)基或來自培養(yǎng)過程

點評：微生物的實驗室分離是高考選修一內(nèi)容的重點，考生應(yīng)下功夫，重點掌握，特別是實驗操作的細(xì)節(jié)，更是�？迹�