Question

我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場(chǎng)自然分娩產(chǎn)出，這標(biāo)志著我國(guó)在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平．如圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）過(guò)程①必需用到的酶是

 

（2）重組質(zhì)粒除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有啟動(dòng)子、終止子和

 

才能構(gòu)成一個(gè)完整的基因表達(dá)載體
（3）為了獲得更多的豬卵母細(xì)胞，可通過(guò)對(duì)母豬注射促性腺激素的方法，做

 

處理，并將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到

 

期即可通過(guò)顯微操作將其細(xì)胞核去除．
（4）我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程運(yùn)用了哪些現(xiàn)代生物技術(shù)

 

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Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專(zhuān)題：

分析：據(jù)圖分析，①表示獲取綠色熒光蛋白基因，②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④表示取供體細(xì)胞的細(xì)胞核，⑤去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，⑥表示核移植，⑦表示早期胚胎的培養(yǎng)，⑧表示胚胎移植．

解答： 解：（1）①過(guò)程表示獲取目的基因，必需用到限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），特點(diǎn)是能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）基因表達(dá)載體含有綠色熒光蛋白基因（目的基因），啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因．
（3）為了獲得更多的豬卵母細(xì)胞，可通過(guò)對(duì)母豬注射促性腺激素的方法，做超數(shù)排卵處理，并將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到減數(shù)分裂第二次分裂中期即可通過(guò)顯微操作將其細(xì)胞核去除．
（4）我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程運(yùn)用了基因工程、核移植、細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等現(xiàn)代生物技術(shù)．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）  
（2）標(biāo)記基因 
（3）超數(shù)排卵                減數(shù)分裂第二次分裂中
（4）基因工程、核移植、細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)圖和分析問(wèn)題的能力，屬于中檔題．獲取目的基因和切割載體時(shí)使用同種限制酶，目的是產(chǎn)生相同的黏性末端．獲取一個(gè)目的基因需限制酶剪切兩次，共產(chǎn)生 4個(gè)黏性末端或平末端．限制酶切割位點(diǎn)的選擇必須保證標(biāo)記基因的完整性，以便于檢測(cè)．