Question

真核生物細胞內，大量DNA和蛋白質以及一些RNA等混雜在一起，難以分離．生物興趣小組的同學為了獲得純度相對較高的DNA展開了實驗探究．
（1）分離各種物質的基本思路是根據DNA和其他物質理化性質的不同而采取一定的方法，如圖是從各種物質之間

 

的差異角度開展研究：
a、取雞血細胞懸液lOml，加蒸餾水20ml，同時用玻璃棒

 

（填“輕輕攪拌”或填“快速攪拌”）．過濾，取濾液，轉移到塑料材質的大燒杯中．
b、沿大燒杯內壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液，用玻棒沿一個方向

 

（填“輕輕攪拌”或填“快速攪拌”），同時不斷收集析出的物質．
如圖是根據雞血中幾種物質的析出情況繪制的曲線，據圖分析：

c、如果只要收集纖維蛋白，可采取的措施是

 

．
d、DNA在飽和度約為

 

的硫酸銨溶液中溶解度最小，與此同時析出的物質還有

 

．
（2）如果要進一步去掉其他雜質，盡可能提高獲得的DNA純度，可采取的兩種辦法有

 

．

Answer 1

考點：DNA的粗提取和鑒定

專題：

分析：分析圖解可知，不同物質在不同飽和度硫酸銨溶液中的溶解度不同，圖中看出，纖維蛋白在30%硫酸銨溶液中溶解度最小，球蛋白在40%硫酸銨溶液中溶解度最小，DNA在飽和度約為50%的硫酸銨溶液中溶解度最�。�
DNA粗提取和鑒定的原理：
1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質溶于酒精；
2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性．

解答： 解：（1）分析曲線圖可知，不同物質在不同濃度的硫酸銨中的析出的相對量有所差別，即分離各種物質的基本思路是根據DNA和其他物質之間溶解度的差異角度開展研究：
a、取雞血細胞懸液lOml，加蒸餾水20ml，此時可以用玻璃棒快速攪拌，以加速血細胞的破裂．
b、沿大燒杯內壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液，為了防止將DNA的絮狀物攪碎，此時應用玻棒沿一個方向輕輕攪拌，同時不斷收集析出的物質．
c、圖中看出，纖維蛋白的溶解度最低，硫酸銨濃度在20%之前已經開始析出，說明溶解度開始減小；在濃度為30%時析出最快，說明此時的溶解度最低，并且超過30%后球蛋白也將逐漸析出，因此如果只要收集纖維蛋白，可以在硫酸銨濃度達到30%之前收集析出物．
d、圖中看出，DNA在飽和度約為50%的硫酸銨溶液中溶解度最小，與此同時析出的物質還有球蛋白，只是球蛋白析出量較少．
（2）如果要進一步去掉其他雜質，盡可能提高獲得的DNA純度，可將DNA與球蛋白的混合物加入到冷卻酒精中，由于DNA不溶于酒精，而其它雜質可溶于酒精，因此收集再次析出物；酶具有專一性，可以用嫩肉粉（木瓜蛋白酶）處理溶有DNA與蛋白質的溶液，此時蛋白質可以水解，因此可以分離DNA和蛋白質；又由于DNA和蛋白質對高溫的耐受性不同，蛋白質容易將溶有DNA與蛋白質的溶液放在60～75℃的恒溫水浴箱中保溫一段時間．
故答案為：
（1）溶解度  
a、快速攪拌  
b、輕輕攪拌
c、在硫酸銨濃度達到30%之前收集析出物  
d、50%    球蛋白
（2）將DNA與球蛋白的混合物加入到冷卻酒精中，收集再次析出物；用嫩肉粉（木瓜蛋白酶）處理溶有DNA與蛋白質的溶液；將溶有DNA與蛋白質的溶液放在60～75℃的恒溫水浴箱中保溫一段時間

點評：本題考查了DNA的粗提取與鑒定的相關知識，包括實驗的原理、操作步驟等，意在考查考生的識記能力和實驗操作能力，難度適中．考生注意識記純化提取DNA的方法的區(qū)別，可以利用酒精（DNA不溶，雜質溶）、高濃度的鹽溶液（DNA溶，雜質不溶）、低濃度的鹽溶液（DNA不溶，雜質溶）、蛋白酶（蛋白酶可以水解蛋白質，不能水解DNA）等分別去除雜質．