Question

【題目】我國科學(xué)家利用生物工程技術(shù)成功地培育出人溶菌酶轉(zhuǎn)基因豬�；卮鹣铝袉栴}：

（1）為獲取大量的人溶菌酶基因，常用_____________________技術(shù)進行擴增，該技術(shù)的原理是________________________________。

（2）培育人溶菌酶轉(zhuǎn)基因豬過程中，其核心步驟是___________________________。目的基因進入受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為____________。

（3）將受精卵培養(yǎng)至早期胚胎，胚胎的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除一些無機鹽和有機鹽外，還需要維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及___________等物質(zhì)。體外培養(yǎng)受精卵時，需要提供一定濃度的CO2，其目的是__________________________________。

（4）受精卵經(jīng)早期胚胎培養(yǎng)后進行胚胎移植，移植到受體子宮中，早期胚胎的_________會形成胎盤和胎膜。也可在移植前對早期胚胎進行胚胎分割而得到兩個或多個胚胎，要注意將內(nèi)細(xì)胞團進行均等分割，否則_______________________。

Answer 1

【答案】PCR DNA雙鏈復(fù)制 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 轉(zhuǎn)化 血清 維持培養(yǎng)液的pH 滋養(yǎng)層 會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育

【解析】

1、目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

3、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：（1）充足的營養(yǎng)供給--微量元素、無機鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等。（2）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。（3）無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。（4）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

（1）為獲取大量的目的基因，常用PCR技術(shù)進行擴增，該技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制。

（2）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。目的基因進入受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為轉(zhuǎn)化。

（3）胚胎的培養(yǎng)液成分除一些無機鹽和有機鹽外，還需要維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及血清等物質(zhì)。體外培養(yǎng)受精卵時，需要提供一定濃度的CO2，其目的是維持培養(yǎng)液的pH。

（4）囊胚的滋養(yǎng)層會形成胎盤和胎膜，內(nèi)細(xì)胞團發(fā)育成胎兒各組織器官。胚胎分割要注意將內(nèi)細(xì)胞團進行均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。