Question

4．手足口病是五歲以下兒童中常見的傳染性疾病．柯薩奇病毒A16型（CA16）和腸道病毒71型（EV71）是引起手足口病的兩個(gè)最主要的病原體，感染EV71或CA16都有可能引起嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥甚至導(dǎo)致死亡．可利用生物技術(shù)手段制備手足口病疫苗，請(qǐng)根據(jù)所學(xué)知識(shí)分析回答下列相關(guān)問題：
（1）為獲得大量手足口病的抗體，可將經(jīng)手足口病原體免疫過的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，最常用的誘導(dǎo)融合手段是滅活的病毒．至少經(jīng)過兩次篩選后獲得的雜交瘤細(xì)胞，可通過體外細(xì)胞培養(yǎng)和小鼠腹水提�。�體內(nèi)培養(yǎng)）生產(chǎn)大量抗體．這種方法獲得的抗體具有靈敏度高、特異性強(qiáng)和可大量制備的優(yōu)點(diǎn)．若得到的抗體不易保存，可通過蛋白質(zhì)工程對(duì)天然抗體進(jìn)行改造，使其滿足人類需要．
（2）科學(xué)家研制手足口病基因疫苗的基本過程為：獲取病毒某基因后，與運(yùn)載體結(jié)合形成的表達(dá)載體還必須具備啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；注入機(jī)體基因表達(dá)后，產(chǎn)生病毒的抗原（填“抗體”或“抗原”），從而使機(jī)體對(duì)該病毒產(chǎn)生免疫．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞．利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，在經(jīng)過兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．兩次抗體檢測(cè)：專一抗體檢驗(yàn)陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細(xì)胞．最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體．
2、基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因
①啟動(dòng)子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)．
②終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端．
③標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．常用的標(biāo)記基因是抗生素基因．

解答 解：（1）制備單克隆抗體需利用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合．誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的技術(shù)手段為利用滅活的病毒．融合之后需經(jīng)過至少兩次篩選，獲得能分泌特異性抗體雜交瘤細(xì)胞．獲得的雜交瘤細(xì)胞可通過體外細(xì)胞培養(yǎng)或小鼠腹水培養(yǎng)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，獲得大量抗體．單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備的特點(diǎn)．對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行改造屬于蛋白質(zhì)工程．
（2）獲取的目的基因可以與運(yùn)載體結(jié)合構(gòu)建形成基因表達(dá)載體．構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體除目的基因外還必須含有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因．導(dǎo)入的目的基因表達(dá)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，所以其表達(dá)產(chǎn)物應(yīng)是抗體．
故答案為：
（1）經(jīng)手足口病原體免疫過的B淋巴   骨髓瘤   滅活的病毒   兩   體外細(xì)胞培養(yǎng)   小鼠腹水提取（體內(nèi)培養(yǎng)）     靈敏度高   特異性強(qiáng)    可大量制備（順序可顛倒）   蛋白質(zhì)
（2）運(yùn)載體    啟動(dòng)子   終止子   標(biāo)記基因   抗原

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查單克隆抗體的制備過程、基因工程和蛋白質(zhì)工程，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問題的能力，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．