Question

17．口蹄疫是由RNA病毒引起的一種偶蹄動(dòng)物傳染�。�科學(xué)家嘗試?yán)�用轉(zhuǎn)基因番茄來生產(chǎn)口蹄疫疫苗（主要成分：該病毒的一種結(jié)構(gòu)蛋白VP1），過程如圖所示．請回答下列問題：

（1）在①過程中，研究人員首先獲取VP1基因，并采用PCR技術(shù)對其進(jìn)行擴(kuò)增，該技術(shù)需要的條件是引物、酶、原料、模板．
（2）②過程中，構(gòu)建的基因表達(dá)載體中的啟動(dòng)子和終止子是一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，它們驅(qū)動(dòng)和終止的是轉(zhuǎn)錄過程．
（3）④過程將VP1基因?qū)�入番茄�?xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，該方法依據(jù)的原理是番茄葉片受損后分泌的酚類化合物的趨化性．
（4）⑤過程代表的是脫分化；⑥過程培養(yǎng)基中需要添加卡那霉素（物質(zhì)）方可篩選能表達(dá)疫苗的細(xì)胞；檢測轉(zhuǎn)化成功的番茄植株，除檢測標(biāo)記基因產(chǎn)物外，還可采用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因在番茄體內(nèi)是否成功翻譯．
（5）將從轉(zhuǎn)化成功的番茄植株中分離得到的VP1蛋白注射給小鼠，取小鼠的B淋巴細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合，經(jīng)過篩選與檢測，最終制備的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別VP1蛋白．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示是利用轉(zhuǎn)基因番茄來生產(chǎn)口蹄疫疫苗的流程圖，其中①為獲取目的基因的過程；②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；③④表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；⑤表示脫分化過程；⑥為再分化過程；⑦為試管苗的生長發(fā)育過程．

解答 解：（1）PCR技術(shù)可在體外快速擴(kuò)增目的基因，PCR的條件：模板（目的基因）、原料（四種脫氧核苷酸）、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（2）在②過程中，構(gòu)建的基因表達(dá)載體中的啟動(dòng)子和終止子是一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，它們驅(qū)動(dòng)和終止的是轉(zhuǎn)錄過程．
（3）④過程將VP1基因?qū)�入番茄�?xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，該方法依據(jù)的原理是番茄葉片受損后分泌的酚類化合物的趨化性．
（4）⑤過程代表的是植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化；⑥過程培養(yǎng)基中需要添加卡那霉素方可篩選能表達(dá)疫苗的細(xì)胞；檢測轉(zhuǎn)化成功的番茄植株，除檢測標(biāo)記基因產(chǎn)物外，還可采用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因在番茄體內(nèi)是否成功翻譯．
（5）將從轉(zhuǎn)化成功的番茄植株中分離得到的VP1蛋白注射給小鼠，取小鼠的B淋巴細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合，經(jīng)過篩選與檢測，最終制備的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別VP1蛋白．
故答案為：
（1）PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）      引物    
（2）DNA      轉(zhuǎn)錄
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法    酚類              
（4）脫分化   卡那霉素   抗原-抗體雜交
（5）骨髓瘤細(xì)胞       （抗VP1蛋白的）單克隆抗體

點(diǎn)評 本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟及應(yīng)用，掌握各操作步驟中的方法及相關(guān)事項(xiàng)；識(shí)記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理、條件及應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．