Question

【題目】常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進(jìn)行酒精發(fā)酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖產(chǎn)生酒精。請(qǐng)分析回答下列問題：

(1)若要從自然界收集的酵母菌菌株中篩選出能高效利用木糖的菌種，則篩選的基本思路是_______。

(2)將篩選出來的酵母菌放入____ (填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)后分成兩部分，一部分進(jìn)行稀釋計(jì)數(shù)，若在3個(gè)平板上各接種稀釋倍數(shù)為104的菌液0.lmL，培養(yǎng)一段時(shí)間后平板上的菌落數(shù)分別為39、48、54,則每升原樣液中酵母菌數(shù)為_____；另一部分可用_______________法進(jìn)行長(zhǎng)期保存。

(3)純化后的酶A可以用電泳法檢測(cè)其相對(duì)分子質(zhì)量大小。在相同條件下電泳時(shí)，帶電荷相同的蛋白質(zhì)_______，說明其分子質(zhì)量越大。

(4)生產(chǎn)上將酶A固定化以反復(fù)利用。部分操作如下:將酶A固定在____________的多孔性載體上，將其裝入反應(yīng)柱內(nèi)后，需用______充分洗滌固定化酶柱，以除去未吸附的酶A。

Answer 1

【答案】將從自然界收集的酵母菌菌株接種到以木糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上，在無氧條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，取存活下來的酵母菌重復(fù)上述過程 液體 4.7×109個(gè) 甘油管藏 遷移速度越慢 不溶于水 蒸鎦水

【解析】

根據(jù)題干信息“常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖”，則常見的釀酒酵母在以木糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中死亡；而“自然界中一些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精”說明這些酵母菌含有相關(guān)木糖發(fā)酵有關(guān)的酶（酶A）的基因。釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進(jìn)行酒精發(fā)酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精，但是對(duì)酒精的耐受能力差。

（1）根據(jù)以上分析已知，某些酵母菌可以分解木糖，可以在以木糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，而釀酒酵母不能分解木糖，因此將從自然界收集的酵母菌菌株接種到以木糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上，在無氧條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，取存活下來的酵母菌重復(fù)上述過程，可以獲得能高效利用木糖的菌種。

（2）將酵母菌擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)該用液體培養(yǎng)基；根據(jù)題干數(shù)據(jù)分析，已知稀釋倍數(shù)為104，菌液體積為0.lmL，且三個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是39、48、54，則每升原樣液中酵母菌數(shù)=（39+48+54）÷3×104÷0.l×1000=4.7×109個(gè)；菌種長(zhǎng)期保存可以用甘油管藏法。

（3）在相同條件下電泳時(shí)，帶電荷相同的蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量越大，遷移速度越慢。

（4）利用物理吸附法固定化酶A時(shí)，應(yīng)該將酶A固定在不溶于水的多孔性載體上，將其裝入反應(yīng)柱內(nèi)后，需用蒸鎦水充分洗滌固定化酶柱，以除去未吸附的酶A。