Question

14．請(qǐng)回答下列有關(guān)胚胎工程和基因工程方面的問(wèn)題：
（1）理論上 cDNA 文庫(kù)含有生物的部分基因．
（2）目前，科學(xué)家通過(guò)細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)，培育出多種哺乳動(dòng)物新類(lèi)型．在哺乳動(dòng)物的核移植實(shí)驗(yàn) 中，一般通過(guò)電脈沖（或電刺激）（物理方法）將受體細(xì)胞激活，使其進(jìn)行細(xì)胞分裂并發(fā)育． 利用體細(xì)胞進(jìn)行核移植技術(shù)的難度明顯高于利用胚胎細(xì)胞進(jìn)行核移植的原因是．
（3）在“試管牛”的培育過(guò)程中，要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對(duì)精子進(jìn)行獲能 處理．另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至減數(shù)分裂第二次分裂中期，該時(shí)期在顯微鏡下可觀察到次 級(jí)卵母細(xì)胞和第一極體．
（4）要使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：某種牛乳 腺分泌蛋白基因及其人干擾素基因（或目的基因）、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)等． 目前常用的措施是將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的受精卵（填“受精卵”或“乳腺細(xì)胞”），導(dǎo) 入方法是顯微注射法．
（5）將（4）獲得的受精卵通過(guò)胚胎移植技術(shù)最終獲得符合要求的個(gè)體，移植中“受體“是 指桑椹胚或囊胚；“符合要求的個(gè)體“指能分泌含人胰島素牛奶的母牛．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、受精前的準(zhǔn)備階段
（1）準(zhǔn)備階段1-精子獲能．剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在雌性動(dòng)物生殖道發(fā)生相應(yīng)的生理變化后，才能獲得受精能力．
（2）準(zhǔn)備階段2-卵子的準(zhǔn)備，動(dòng)物排出的可能是初級(jí)卵母細(xì)胞也可能是次級(jí)卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具備與精子受精的能力．

解答 解：（1）基因組文庫(kù)含有某種生物的全部基因；cDNA文庫(kù)中只含有該種生物的部分基因．
（2）在哺乳動(dòng)物的核移植實(shí)驗(yàn)中，一般通過(guò)電脈沖（或電刺激）將受體細(xì)胞激活，使其進(jìn)行細(xì)胞分裂并發(fā)育；當(dāng)胚胎發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段時(shí)，將胚胎植入另一雌性（代孕）動(dòng)物體內(nèi)．由于體細(xì)胞分化程度高，不容易恢復(fù)全能性，因此利用體細(xì)胞進(jìn)行核移植技術(shù)的難度明顯高于利用胚胎細(xì)胞進(jìn)行核移植．
（3）體外受精時(shí)，需要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理．另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至MⅡ中期（減數(shù)分裂第二次分裂中期）．在顯微鏡下可觀察到次 級(jí)卵母細(xì)胞和第一極體．
（4）基因表達(dá)載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動(dòng)子、人干擾素基因（或目的基因）、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)等．培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí)，常以受精卵為受體細(xì)胞，且將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（5）進(jìn)行胚胎移植時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚．科學(xué)家用基因工程的技術(shù)獲取乳腺發(fā)生器的生物，即能分泌含人胰島素牛奶的母牛．
故答案為：
（1）部分
（2）電脈沖（或電刺激）    桑葚胚或囊胚       由于體細(xì)胞分化程度高，不容易恢復(fù)全能性
（3）獲能   第一極體
（4）復(fù)制原點(diǎn)        受精卵     顯微注射法
（5）桑椹胚或囊胚     能分泌含人胰島素牛奶的母牛

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記核移植的具體過(guò)程；胚胎移植的基本程序；識(shí)記基因工程的具體操作步驟，掌握各步驟中的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．