Question

9．有同學(xué)用三種方法進(jìn)行DNA的粗提取和鑒定，使用分光光度計(jì)測(cè)量提取物吸光值并得到了相應(yīng)的數(shù)據(jù)，過(guò)程和結(jié)果如表．下列相關(guān)分析正確的是：（　　）

	實(shí)驗(yàn)1	實(shí)驗(yàn)2	實(shí)驗(yàn)3
1．提取口腔上皮細(xì)胞	溫開(kāi)水漱口，手指輕揉雙頰1min后將漱口水吐入 100mL 小燒杯中
2．溶解DNA	取 50mL漱口水倒入小燒杯中，再加入 5g NaCl 和 10mL稀釋了 6～8 倍的洗滌劑，攪拌至溶解，平均分為3組
3．分組粗提取DNA	不做任何處理	加入半匙嫩肉粉	60℃熱水浴10分鐘
4．分離DNA	加入2倍體積95%的冷酒精，不攪動(dòng)，十幾秒后看到絲狀的DNA析出，輕輕晃動(dòng)小燒杯，用玻璃棒纏繞帶出漂到液面上層的DNA．
5．鑒定  10ml漱口水	0.072	0.125	0.065
數(shù)據(jù)  15ml漱口水	0.091	0.146	0.074
20ml漱口水	0.121	0.168	0.101

• A． 實(shí)驗(yàn)中加入NaCl是因?yàn)镈NA溶于NaCl溶液不溶于水
• B． 進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)之前，應(yīng)該用生理鹽水多次漱口，避免食物殘?jiān)�影響�?shí)驗(yàn)結(jié)果
• C． 數(shù)據(jù)表明增加原材料用量、使用嫩肉粉可以提高DNA的提取量
• D． 60℃熱水浴提取DNA的量比對(duì)照組少是因?yàn)楦邷仄茐牧思?xì)胞內(nèi)的DNA酶

Answer 1

分析 1、DNA粗提取和鑒定的原理：
（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性．
（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色．
2、DNA粗提取和鑒定的過(guò)程：
（1）實(shí)驗(yàn)材料的選�。悍彩呛�有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：
動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過(guò)濾后收集濾液即可．如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質(zhì)：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．
方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開(kāi)；方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離．
（4）DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)．

解答 解：A、DNA能溶于水，A錯(cuò)誤；
B、進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)之前，應(yīng)該用生理鹽水多次漱口，避免食物殘?jiān)�影響�?shí)驗(yàn)結(jié)果，B正確；
C、數(shù)據(jù)表明增加原材料用量、使用嫩肉粉可以提高DNA的提取量，C正確；
D、DNA與本質(zhì)為蛋白質(zhì)的酶對(duì)溫度的耐受性不同，蛋白質(zhì)在60-80度會(huì)變性，而DNA在80度以上才會(huì)變性，60℃保溫水浴能破壞細(xì)胞DNA降解酶的活性同時(shí)還能保護(hù)DNA，D錯(cuò)誤．
故選：BC．

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累．