Question

17．請(qǐng)回答下列有關(guān)生物工程方面的問(wèn)題：
（1）目前，科學(xué)家通過(guò)細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)，培育出多種哺乳動(dòng)物新類型．在哺乳動(dòng)物的核移植實(shí)驗(yàn)中，一般通過(guò)電脈沖（或電刺激）（物理方法）將受體細(xì)胞激活，使其進(jìn)行細(xì)胞分裂并發(fā)育，當(dāng)胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段時(shí)，將胚胎植入另一雌性（代孕）動(dòng)物體內(nèi)．
（2）在“試管�！钡呐嘤�過(guò)程中，要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理．另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至MⅡ中期（減數(shù)分裂第二次分裂中期），該時(shí)期在顯微鏡下可觀察到次級(jí)卵母細(xì)胞和第一極體．
（3）將已免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程中至少要進(jìn)行兩次篩選，一次是通過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，另一次是通過(guò)抗體檢測(cè)篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（4）若要使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則所構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動(dòng)子、人干擾素基因（或目的基因）、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)等．目前常用的措施是將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的受精卵（填“受精卵”或“乳腺細(xì)胞”）．

Answer 1

分析 1、基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因+復(fù)制原點(diǎn)．
2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．
3、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查．

解答 解：（1）在哺乳動(dòng)物的核移植實(shí)驗(yàn)中，一般通過(guò)電脈沖（或電刺激）將受體細(xì)胞激活，使其進(jìn)行細(xì)胞分裂并發(fā)育；胚胎移植時(shí)，需要將胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段．
（2）體外受精時(shí)需要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理．另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至 MⅡ中期（減數(shù)分裂第二次分裂中期）．
（3）將已免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程中至少要進(jìn)行兩次篩選，一次是通過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，另一次是通過(guò)抗體檢測(cè)篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（4）基因表達(dá)載體的組成必須包括：?jiǎn)��?dòng)子、人干擾素基因（或目的基因）、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)等．目前常用的措施是將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的受精卵，因?yàn)槭芫�卵的全能性最高，最容易表達(dá)出來(lái)．
故答案為：
（1）電脈沖（或電刺激）   桑椹胚或囊胚
（2）獲能    MⅡ中期（減數(shù)分裂第二次分裂中期）
（3）選擇   抗體檢測(cè)
（4）人干擾素基因（或目的基因）  受精卵

點(diǎn)評(píng) 本題綜合考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程；識(shí)記胚胎移植的基本程序，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．