Question

18．我國糧產(chǎn)區(qū)產(chǎn)生的大量的作物秸稈，科技工作者研究出利用秸稈生產(chǎn)燃料酒精的技術(shù)，大致流程為（以玉米秸稈為例）：

（1）玉米秸稈預處理后，應該選用特定的酶進行水解，使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖．從以下哪些微生物中可以提取到上述的酶？B
A．釀制果醋的醋酸菌      B．生長在腐木上的霉菌
C．制作酸奶的乳酸菌      D．生產(chǎn)味精的谷氨酸棒狀桿菌
（2）若要從土壤中分離生產(chǎn)這種酶的微生物，所需要的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基（按功能分），培養(yǎng)基中的碳源為纖維素．對培養(yǎng)基進行滅菌，應該采用的方法是高壓蒸汽滅菌法．
（3）某同學對這種微生物培養(yǎng)液進行數(shù)量測定，在稀釋倍數(shù)為10⁵對應的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL）1.17×10⁷．
（4）用這種方法測定密度，實際活菌數(shù)量要比測得的菌落數(shù)量多，原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落．
（5）上述流程圖中，發(fā)酵階段需要的菌種是酵母菌，生產(chǎn)酒精要控制的必要條件是無氧（密封、密閉）．

Answer 1

分析 用植物秸稈生產(chǎn)酒精是利用微生物進行發(fā)酵的過程．
植物秸稈中的有機物主要是纖維素，纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶能將其水解成葡萄糖．
從土壤中分離纖維素分解菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．
篩選纖維素分解菌必須使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，并且需要做產(chǎn)纖維素酶發(fā)酵葡萄糖的實驗進行酶活性的檢測．

解答 解：（1）生長在腐木上的霉菌、生長在落葉堆中的蘑菇及反芻動物瘤胃中生存的某些微生物中含有纖維素酶，故選：B．
（2）篩選目的微生物需要使用選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的碳源為纖維素，培養(yǎng)基需要進行高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（3）根據(jù)題意可知，每毫升樣品中的菌落數(shù)是23.4×10⁵÷0.2=1.17×10⁷．
（4）用稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落，所以實際活菌數(shù)量要比測得的菌落數(shù)量多．
（5）上述流程圖中，發(fā)酵階段需要的菌種是酵母菌，酵母菌無氧呼吸可以產(chǎn)生酒精，生產(chǎn)酒精要控制的必要條件是無氧（密封、密閉）．
故答案為：
（1）B
（2）選擇培養(yǎng)基      纖維素     高壓蒸汽滅菌法
（3）1.17×10⁷
（4）當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落
（5）酵母菌      無氧（密封、密閉）

點評 本題主要考查纖維素分解菌的篩選和發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶分解葡萄糖的實驗，要求學生實驗的原理和方法，掌握微生物培養(yǎng)過程中的滅菌方法，掌握釀酒的原理和方法，難度適中．