Question

18．轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是人們較早應(yīng)用基因重組技術(shù)的推廣項(xiàng)目，目前轉(zhuǎn)基因技術(shù)有了新的改進(jìn)．如圖所示．請(qǐng)根據(jù)所學(xué)知識(shí)回答下列問題：
（1）啟動(dòng)子的作用是與RNA聚合酶進(jìn)行識(shí)別和結(jié)合，從而驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄過程．目的基因與載體結(jié)合主要依靠二者含有相同的黏性末端．若限制酶切出了平末端，要選用T₄DNA連接酶進(jìn)行連接．圖中構(gòu)建重組質(zhì)粒選擇的限制酶是EcoRⅠ和BamHⅠ．
（2）一般試管苗的形成．先誘導(dǎo)生成叢芽（填“叢芽”或“根”）．原因是進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物，利于生長(zhǎng)．
（3）將目的基因?qū)�入植物受體細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法等．

Answer 1

分析 1、分析圖解：圖中SalⅠ限制酶的切割位點(diǎn)存在于目的基因的中間位置，若使用該限制酶切割目的基因會(huì)導(dǎo)致目的基因失活，因此應(yīng)選擇EcoRⅠ、BamHⅠ兩種酶切割目的基因和質(zhì)粒．
2、兩種DNA連接酶（E•coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶）的比較：
①相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵．
②區(qū)別：E•coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T₄DNA連接酶來源于T₄噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低．

解答 解：（1）啟動(dòng)子是RNA聚合酶進(jìn)行識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，從而驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄過程．目的基因與載體結(jié)合主要依靠二者含有相同的黏性末端．若限制酶切出了平末端，要選用T₄DNA連接酶進(jìn)行連接．圖中SalⅠ限制酶的切割位點(diǎn)存在于目的基因的中間位置，若使用該限制酶切割目的基因會(huì)導(dǎo)致目的基因失活，因此應(yīng)選擇EcoRⅠ、BamHⅠ構(gòu)建重組質(zhì)粒．
（2）一般試管苗形成后，可進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物，利于生長(zhǎng)，因此先誘導(dǎo)生成叢芽．
（3）將目的基因?qū)�入植物受體細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法等．
故答案為：
（l）RNA聚合酶     黏性末端    T₄DNA連接酶     EcoRⅠ和BamHⅠ
（2）叢芽         進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物，利于生長(zhǎng)
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法       基因槍法      花粉管通道法

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程、細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，識(shí)記目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．