Question

科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與某種細(xì)菌（不含抗生素抗性基因）的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在該細(xì)菌中得以表達(dá)（如圖）．請(qǐng)據(jù)圖分析回答：
（1）過(guò)程①所示獲取目的基因的方法是

 

．
（2）細(xì)菌是理想的受體細(xì)胞，這是因?yàn)樗?

 

．
（3）質(zhì)粒A與目的基因結(jié)合時(shí)，首先需要用限制酶酶將質(zhì)粒切開(kāi)“缺口”，然后用

 

酶將質(zhì)粒與目的基因“縫合”起來(lái)．
（4）若將細(xì)菌B先接種在含有

 

的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，說(shuō)明該細(xì)菌中已經(jīng)導(dǎo)入外源質(zhì)粒，但不能說(shuō)明外源質(zhì)粒是否成功插入目的基因；若將細(xì)菌B再重新接種在含有

 

的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)，則說(shuō)明細(xì)菌B中已經(jīng)導(dǎo)入了插入目的基因的重組質(zhì)粒．
（5）檢測(cè)工程菌中的生長(zhǎng)激素基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA和是否翻譯出生長(zhǎng)激素，可采用的技術(shù)分別是

 

、

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：①是利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因（人的生長(zhǎng)激素基因）的過(guò)程；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，該過(guò)程需要限制酶和DNA連接酶；③是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程；最后檢測(cè)和篩選出工程菌．

解答： 解：（1）由圖可知，①過(guò)程中獲取目的基因的方法是反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）．
（2）細(xì)菌繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，是基因工程中理想的受體細(xì)胞．
（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，先用限制酶酶切割質(zhì)粒，再用DNA連接酶將質(zhì)粒與目的基因連接形成重組質(zhì)粒．
（4）由圖可知，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，但沒(méi)有破環(huán)氨芐青霉素抗性基因，因此導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存，但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存．若將細(xì)菌B先接種在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，說(shuō)明該細(xì)菌中已經(jīng)導(dǎo)入外源質(zhì)粒，但不能說(shuō)明外源質(zhì)粒是否成功插入目的基因；若將細(xì)菌B再重新接種在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)，則說(shuō)明細(xì)菌B中已經(jīng)導(dǎo)入了插入目的基因的重組質(zhì)粒．
（5）檢測(cè)工程菌中的生長(zhǎng)激素基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，可采用分子雜交技術(shù)；檢測(cè)生長(zhǎng)激素基因是否翻譯出生長(zhǎng)激素，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）
（2）繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少
（3）DNA連接酶
（4）氨芐青霉素    四環(huán)素
（5）分子雜交   抗原-抗體雜交

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合利用基因工程生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的流程圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細(xì)節(jié)或采用的方法，能結(jié)合圖中信息答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．