Question

【題目】【生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題】

噬菌體抗體庫技術是指將人的全部抗體基因插入噬菌體的基因組中,然后讓該噬菌體感染大腸桿菌，最終使抗體以融合蛋白的形式表達于噬菌體的表面，形成含有全套抗體譜的噬菌體抗體庫。請問答下列問題：

（1）人體內(nèi)的抗體是在________(細胞名稱)中合成后，以胞吐的方式分泌到內(nèi)環(huán)境中的。

（2）若要獲取人的抗體基因，可以從細胞中提取相應的RNA，通過逆轉錄過程獲 取______片段，再合成目的基因。采用PCR技術擴增目的基因的過程中,需要的物質除模板鏈、四種脫氧核苷酸外,還需要____________。

（3）構建重組DNA分子的目的是______________。在噬菌體抗體庫的構建過程中，是否需要利用CaCl2處理大腸桿菌以制備感受態(tài)細胞？請寫出原因:_______。

（4）檢測大腸桿菌轉錄出的相應RNA時應采用_______技術，即從原核細胞中提取RNA,以________為探針,與RNA雜交。該技術的原理是___________。

Answer 1

【答案】 漿細胞 cDNA 引物和DNA聚合酶(Taq酶) 使人的抗體基因在大腸桿菌細胞中穩(wěn)定表達，并能傳遞給下一代 不需要，噬菌體可以侵染大腸桿菌，將重組DNA分子注入大腸桿菌 分子雜交 用放射性同位素標記的目的基因（放射性同位素標記的抗體基因） 堿基互補配對

【解析】試題分析：本題綜合考查學生對基因工程的知識的識記和理解能力。解答本題需熟記并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知識網(wǎng)絡。在此基礎上，結合問題情境，從題意中提取有效信息并與噬菌體侵染細菌的實驗原理、分泌蛋白的概念與分泌過程建立聯(lián)系，進行相關問題的解答。

(1)人體內(nèi)的抗體是在漿細胞中合成后，以胞吐的方式分泌到內(nèi)環(huán)境中。

(2)從人的細胞中提取抗體基因的RNA，通過逆轉錄過程獲取cDNA片段，再合成目的基因。采用PCR技術擴增目的基因的過程中,需要的物質除模板鏈、四種脫氧核苷酸外,還需要引物和DNA聚合酶(Taq酶)。

(3)構建重組DNA分子（基因表達載體）的目的是：使人的抗體基因在大腸桿菌細胞中穩(wěn)定表達，并能傳遞給下一代。由于噬菌體可以侵染大腸桿菌，將重組DNA分子注入到大腸桿菌，因此在噬菌體抗體庫的構建過程中，不需要利用CaCl2處理大腸桿菌以制備感受態(tài)細胞。

(4) 檢測大腸桿菌轉錄出的相應RNA時應采用分子雜交技術，即從原核細胞中提取RNA,以用放射性同位素標記的目的基因（放射性同位素標記的抗體基因）為探針,與RNA雜交。該技術的原理是堿基互補配對。