Question

9．如圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點．
據(jù)圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用HindⅢ和BamHⅠ限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素 的培養(yǎng)基上進行．
（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達的調(diào)控序列是人乳鐵蛋白基因啟動子．
（3）過程①可采用的操作方法是顯微注射法．
（4）早期胚胎的內(nèi)細(xì)胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤．
（5）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用C（填字母代號）技術(shù)．
A．核酸分子雜交  B．基因序列分析  C．抗原-抗體雜交  D．PCR
（6）體外受精主要包括卵母細(xì)胞的采集、精子的獲取 和受精等幾個主要步驟．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖中質(zhì)粒包括四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、啟動子、復(fù)制原點，以及兩個限制酶切點，并且兩個限制酶切點的位置均在四環(huán)素抗性基因上；目的基因上有三個限制酶切點，與質(zhì)粒對照，共有的是BamHⅠ、HindⅢ．
圖中①表示目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，②表示通過胚胎移植的方式將早期胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)．

解答 解：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、SmaI的切割位點，其中限制酶SmaI的切割位點位于目的基因上，所以獲取目的基因和構(gòu)建基因表達載體時，應(yīng)用限制酶HindⅢ和BamHⅠ．用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質(zhì)粒后，會破壞質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因，但不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行．
（2）啟動子是能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達的調(diào)控序列．
（3）過程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，當(dāng)受體細(xì)胞是動物細(xì)胞時，將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（4）早期胚胎的內(nèi)細(xì)胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤．
（5）由于人乳鐵蛋白發(fā)球蛋白質(zhì)，所以為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
（6）體外受精主要包括卵母細(xì)胞的采集、精子的獲取和受精等幾個主要步驟．
故答案為：
（1）HindⅢ和BamHⅠ氨芐青霉素
（2）人乳鐵蛋白基因啟動子
（3）顯微注射法   
（4）胎兒的各種組織     胎膜和胎盤   
（5）C  
（6）精子的獲取

點評 本題結(jié)合乳腺生物反應(yīng)器培育過程圖和曲線圖，考查基因工程、胚胎工程、基因頻率的變化及生物進化等知識，要求考生識記基因工程的工具和操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱或采用的技術(shù)；識記胚胎分割技術(shù)的理論基礎(chǔ)，能提取圖中有效信息答題．