Question

【題目】回答下列（一）（二）小題

(一）請(qǐng)回答果醋制作和醋化醋桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)及篩選的相關(guān)問(wèn)題：

(1)醋酸桿菌在_________條件下才能將乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸，因此需要持續(xù)往發(fā)酵瓶中通入足量的_______。

(2)底物充足條件下，醋酸發(fā)酵液pH值變化是________(A.持續(xù)變大B.先變大后穩(wěn)定C.持續(xù)變小D.先變小后穩(wěn)定）。

(3)對(duì)醋酸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)所需的液體培養(yǎng)基（1L)配方為：蛋白胨3g、酵母提取物5g、______25g和蒸餾水，并調(diào)PH至______，再用_______法進(jìn)行滅菌。若要分離醋酸桿菌，還需在上述的培養(yǎng)基中加入適量的______________。

(二）請(qǐng)回答利用基因工程生產(chǎn)人胰島素的相關(guān)問(wèn)題：

(1)先從人體___________細(xì)胞中獲取控制人胰島素合成的mRNA,然后在_______酶催化下合成人胰島素基因。

(2)構(gòu)建重組DNA分子通常需要_______的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶使兩者連接在一起。

(3)大腸桿菌的會(huì)________阻礙重組DNA進(jìn)入細(xì)胞，通常使用氯化鈣處理大腸桿菌。

(4)為檢測(cè)目的基因是否在大腸桿菌中高效穩(wěn)定表達(dá)，最簡(jiǎn)單有效的方法是__________(A.檢測(cè)大腸桿菌中有無(wú)人胰島素基因B.檢測(cè)培養(yǎng)基中葡萄糖濃度C.檢測(cè)大腸桿菌中人胰島素基因mRNA含量D.檢測(cè)培養(yǎng)基中胰島素含量）。人胰島素基因能在大腸桿菌中表達(dá)是因?yàn)槿撕痛竽c桿菌共用______。

(5)胰島素除了用于治療糖尿病之外，還可以用來(lái)提高動(dòng)物______________形成率。

Answer 1

【答案】 有氧 經(jīng)過(guò)濾的空氣 D 甘露醇 7.0 高壓蒸汽滅菌 瓊脂 胰島β 逆轉(zhuǎn)錄 相同 細(xì)胞壁 D —套遺傳密碼 細(xì)胞克隆

【解析】（一）（1）醋酸桿菌是需氧型細(xì)菌，所以只有在有氧條件下才能將乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸，因此需要持續(xù)往發(fā)酵瓶中通入足量的經(jīng)過(guò)濾的空氣。

（2）底物充足條件下，醋酸發(fā)酵液有氧不斷產(chǎn)生醋酸，使pH值不斷減小，但減小到一定程度之后，會(huì)導(dǎo)致醋酸桿菌無(wú)法繼續(xù)產(chǎn)生醋酸，所以最后穩(wěn)定，綜上所述，選D。

（3）對(duì)醋酸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)所需的液體培養(yǎng)基（1L)配方為：蛋白胨3g、酵母提取物5g、甘露醇25g和蒸餾水，并調(diào)PH至7.0，再用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。若要分離細(xì)菌，必需固體培養(yǎng)基，所以應(yīng)在上述的培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑——瓊脂。

（二）基因工程制取胰島素：反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因→構(gòu)建基因表達(dá)載體→將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞→對(duì)目的基因進(jìn)行檢測(cè)和鑒定。

（1）由于胰島素只能在胰島β細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，胰島素基因才會(huì)轉(zhuǎn)錄處相應(yīng)的mRNA。為了通過(guò)基因工程制取胰島素，若采用逆轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因，所以必需先從人體胰島β細(xì)胞中獲取控制人胰島素合成的mRNA，然后在反轉(zhuǎn)錄酶催化下合成人胰島素基因。

（2）構(gòu)建重組DNA分子時(shí)，為了保證目的基因能與運(yùn)載體鏈接，通常需要相同的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶使兩者連接在一起。

（3）為了增大大腸桿菌的細(xì)胞壁的通透性，通常使用氯化鈣處理大腸桿菌。

（4）如果目的基因在大腸桿菌中高效穩(wěn)定表達(dá)，最簡(jiǎn)單有效的檢測(cè)方法是檢測(cè)培養(yǎng)基中胰島素含量，所以選D。人胰島素基因能在大腸桿菌中表達(dá)是因?yàn)槿撕痛竽c桿菌共用一套遺傳密碼。

（5）胰島素除了用于治療糖尿病之外，還可以用來(lái)提高動(dòng)物細(xì)胞克隆形成率。