Question

【題目】科研人員通過(guò)體細(xì)胞雜交培育食用菌新品種。

（1）科研人員分別測(cè)定了杏鮑菇（A）和秀珍菇（B）單核菌株、雙核菌株的生長(zhǎng)速度和原生質(zhì)體產(chǎn)量，結(jié)果如下表。

菌株	生長(zhǎng)速度 （cm/d）	原生質(zhì)體產(chǎn)量 （107個(gè)/mL）	菌株	生長(zhǎng)速度 （cm/d）	原生質(zhì)體產(chǎn)量 （107個(gè)/mL）
單核菌株A1	0.28	0.6	單核菌株B1	0.23	3.0
單核菌株A2	0.22	1.5	單核菌株B2	0.31	0.9
雙核菌株A1	0.85	1.8	雙核菌株B1	0.80	0.3
雙核菌株A2	0.71	2.2	雙核菌株B2	0.61	0.3

研究人員最終選擇雙核菌株A1和單核菌株B1作為親本進(jìn)行細(xì)胞融合，選擇的理由是______________。

（2）利用酶解法去除細(xì)胞壁時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格控制酶的_________等條件，以提高原生質(zhì)體產(chǎn)量并降低破損率。

（3）科研人員將雙核菌株A1的原生質(zhì)體進(jìn)行高溫滅活，使其僅能生存而無(wú)法繁殖。將滅活后的雙核菌株A1與未滅活的單核菌株B1的原生質(zhì)體用_________試劑誘導(dǎo)融合。融合過(guò)程需要在_________的緩沖溶液中進(jìn)行，以防止原生質(zhì)體破裂。

（4）科研人員將融合劑處理后的原生質(zhì)體懸液涂布于培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選。

①菌種遺傳背景的差異會(huì)導(dǎo)致菌絲之間出現(xiàn)相互排斥，能夠在培養(yǎng)基上觀察到一條拮抗帶。挑取_________兩側(cè)的一對(duì)菌株進(jìn)行進(jìn)一步篩選。

②研究發(fā)現(xiàn)，雙核菌絲在進(jìn)行細(xì)胞分裂時(shí)，會(huì)形成一個(gè)喙?fàn)罱Y(jié)構(gòu)，稱為鎖狀聯(lián)合，而單核菌絲不出現(xiàn)。單核菌株B1與滅活的雙核菌株A1形成的融合子能夠出現(xiàn)雙核化，也可觀察到鎖狀聯(lián)合�？蒲腥藛T進(jìn)行顯微鏡觀察并從中選擇_________的一對(duì)菌株，進(jìn)行下一步篩選。

③最終篩選出雜合菌株的方法是_________。

Answer 1

【答案】 雙核菌株A1生長(zhǎng)速度快，單核菌株B1原生質(zhì)體產(chǎn)量高 濃度和處理時(shí)間 PEG 等滲 拮抗帶 （拮抗帶）兩側(cè)菌株均有鎖狀聯(lián)合 將上述有鎖狀聯(lián)合的菌種分別與B1培養(yǎng)在同一培養(yǎng)基上，若出現(xiàn)拮抗帶則該菌種為雜合菌株

【解析】試題分析：根據(jù)表格分析，杏鮑菇中雙核菌株A1的生長(zhǎng)速度最高，雙核菌株A2的原生質(zhì)體產(chǎn)量最高；秀珍菇中雙核菌株B1的生長(zhǎng)速度最高，單核菌株B1的原生質(zhì)體產(chǎn)量最高；在兩種真菌中，雙核菌株A1生長(zhǎng)速度快，單核菌株B1原生質(zhì)體產(chǎn)量高。

（1）根據(jù)以上分析，雙核菌株A1生長(zhǎng)速度快，單核菌株B1原生質(zhì)體產(chǎn)量高，因此研究人員最終選擇雙核菌株A1和單核菌株B1作為親本進(jìn)行細(xì)胞融合。

（2）利用酶解法去除細(xì)胞壁時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格控制酶的濃度和處理時(shí)間等條件，以提高原生質(zhì)體產(chǎn)量并降低破損率。

（3）將滅活后的雙核菌株A1與未滅活的單核菌株B1的原生質(zhì)體用PEG試劑誘導(dǎo)融合。融合過(guò)程需要在等滲的緩沖溶液中進(jìn)行，以防止原生質(zhì)體破裂。

（4）①根據(jù)題意，在培養(yǎng)基上觀察到一條拮抗帶，挑取拮抗帶兩側(cè)的一對(duì)菌株進(jìn)行進(jìn)一步篩選。

②根據(jù)題意，科研人員進(jìn)行顯微鏡觀察并從中選擇兩側(cè)菌株均有鎖狀聯(lián)合的一對(duì)菌株，進(jìn)行下一步篩選。

③最終篩選出雜合菌株的方法是將上述有鎖狀聯(lián)合的菌種分別與B1培養(yǎng)在同一培養(yǎng)基上，若出現(xiàn)拮抗帶則該菌種為雜合菌株。