Question

3．通過基因工程的方法，科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉入棉花植株并獲得成功表達．棉鈴蟲吃了這種轉基因棉花的植株后就會死亡．花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發(fā)時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進而導入尚不具備細胞壁的合子或早期胚體細胞中，借助天然的種胚系統(tǒng)，形成含有目的基因的種胚．請回答下列問題：
（1）下列所示的黏性末端是由4種限制性核酸內切酶作用產生的．
（2）利用花粉管通道法將毒蛋白基因導入棉花細胞，此過程是基因工程操作步驟中的第三步，即將目的基因導入受體細胞．獲取目的基因時，如果基因比較小，核苷酸序列又已知，則可以通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成．
（3）該目的基因在導入受體細胞前需要與載體結合，目前經常使用的載體是質粒．
（4）基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定，其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技術是DNA分子雜交技術；其次還要檢測目的基因是否轉出了mRNA，方法同樣是采用分子雜交技術；最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是抗原-抗體雜交．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定．

解答 解：（1）一種限制酶只能識別一種核苷酸序列，所以圖中的四種粘性末端是由四種限制酶切割形成的．
（2）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定．其中目的基因的導入屬于第三步；在獲取目的基因時，如果目的基因太小，核苷酸序列又已知，則不適合直接獲取，可以通過DNA合成儀人工合成．
（3）基因工程中最常用的運載體是質粒，可以將目的基因導入受體細胞．
（4）DNA上是否插入了目的基因的檢測方法是DNA分子雜交技術；目的基因是否轉錄出了mRNA的檢測方法是分子雜交技術；目的基因是否翻譯成蛋白質的檢測方法是抗原--抗體雜交技術．
故答案為：
（1）4　   
（2）將目的基因導入受體細胞    　人工合成　   
（3）質粒 　   
（4）DNA分子雜交技術     　目的基因是否轉出了mRNA    　目的基因是否翻譯成蛋白質　   抗原-抗體

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中應注意的細節(jié)，能結合圖中信息答題．