Question

【題目】某化工廠的污水池中；含有一種有害的、難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示，請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

（1）加入化合物A的培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基，目的菌生長(zhǎng)所需的氮源和碳源是來(lái)自培養(yǎng)基中的______________________________。

（2）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用平板劃線的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選，在每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的是__________________________________________________。

（3）某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)污水池中目的菌的總數(shù)，他選用104、105、106的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿。從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看還應(yīng)該設(shè)置哪些對(duì)照實(shí)驗(yàn)在相同條件下同時(shí)培養(yǎng)？_______________________________________________________________________________________。

（4）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究中，常需要進(jìn)行微生物的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。下圖是利用平板劃線法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，為達(dá)到這一目的，操作上應(yīng)注意。

①____________________________________________________________________。

②____________________________________________________________________。

③_____________________________________________________________________。

Answer 1

【答案】選擇 化合物A 殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種 不接種的空白培養(yǎng)基，證明培養(yǎng)基制備是否合格(是否被雜菌污染) 每次劃線前要灼燒接種環(huán) 冷卻后從上一區(qū)劃線末端開(kāi)始劃 首尾區(qū)不重疊

【解析】

根據(jù)題意分析可知：該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選出高效降解化合物A的細(xì)菌，在以化合物A為唯一碳源的培養(yǎng)基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A為碳源和氮源生長(zhǎng)繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無(wú)法生長(zhǎng)繁殖；分解化合物A的微生物是需氧微生物，因此在培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)該震蕩培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液中的溶氧量滿足微生物對(duì)氧氣的需求。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)應(yīng)該將使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，防止污染環(huán)境。

（1）據(jù)分析知，加入化合物A的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，目的菌生長(zhǎng)所需的氮源和碳源都是來(lái)自培養(yǎng)基中的化合物A。

（2）平板劃線法接種，是通過(guò)劃線逐步稀釋，最后獲得單菌落的方法，所以在每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，以便殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種。

（3）為了證明培養(yǎng)基制備是合格的，沒(méi)有被雜菌污，還應(yīng)該設(shè)置不接種的空白培養(yǎng)基作為對(duì)照。

（4）想要把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，操作上應(yīng)注意：①每次劃線前要灼燒接種環(huán)以便殺死接種環(huán)上殘留的細(xì)菌；②上一區(qū)域末端菌體數(shù)最少，所以冷卻后從上一區(qū)劃線末端開(kāi)始劃；③尾區(qū)已經(jīng)充分稀釋，所以不能與首區(qū)重疊。