Question

15．如圖為單克隆抗體制備流程示意圖 請據(jù)圖分析．

（1）圖中過程①表示注射特定抗原，雜交瘤細胞的特點是既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（2）促進圖中兩種細胞融合最常用的方法是滅活的病毒，過程②只考慮細胞的兩兩融合，則可能會出現(xiàn)3種細胞，圖中用HAT培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是篩選出雜交瘤細胞．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細胞稀釋到7-10分細胞/mL，在每個培養(yǎng)孔滴入0.1mL細胞稀釋液，其目的是使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）．
（4）通過⑤可獲得大量的單克隆抗體，在培養(yǎng)瓶要控制一定的CO₂濃度，原因是維持培養(yǎng)液的pH，此外還可以通過[④]小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)法獲得單克隆抗體．
（5）若用¹⁵N標記的氨基酸培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的細胞，放射性物質(zhì)在細胞器中出現(xiàn)的先后順序是核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體制備技術(shù)是動物細胞融合技術(shù)的應(yīng)用之一，其基礎(chǔ)是動物細胞培養(yǎng)．在制備單克隆抗體時，利用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）．單克隆抗體是由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體．
2、據(jù)圖分析，①過程是將特定的抗原注射小鼠，篩選出產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞；②過程是誘導(dǎo)細胞融合；③過程是篩選出雜交瘤細胞：B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，未融合的細胞死亡，而雜交瘤細胞存活；④過程是通過小鼠腹腔中培養(yǎng)獲得大量的單克隆抗體；⑤過程是培養(yǎng)液中培養(yǎng)獲得大量的單克隆抗體．

解答 解：（1）圖中過程①表示注射特定抗原，獲得免疫的B淋巴細胞．雜交瘤細胞具有骨髓瘤細胞和效應(yīng)B細胞的特點，既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（2）促進圖中兩種動物細胞融合最常用的方法是滅活的病毒，過程②只考慮細胞的兩兩融合，則可能會出現(xiàn)3種細胞：骨髓瘤細胞自身融合的細胞、效應(yīng)B細胞自身融合的細胞、雜交瘤細胞，圖中用HAT培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是篩選出雜交瘤細胞．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細胞稀釋到7～10個細胞/ml，每孔滴入0.1ml細胞稀釋液，其目的是使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）．
（4）通過⑤培養(yǎng)液中培養(yǎng)可獲得大量的單克隆抗體，在培養(yǎng)瓶要控制一定的CO₂濃度，原因是CO₂能維持培養(yǎng)液的pH，此外還可以通過④小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)獲得單克隆抗體．
（5）若用¹⁵N標記的氨基酸培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的細胞，單克隆抗體是分泌蛋白質(zhì)，首先在核糖體中合成，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上初步加工，之后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)邊緣以“出芽”形式冒出囊泡，囊泡離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，轉(zhuǎn)移到高爾基體上，與高爾基體膜融合，囊泡中的物質(zhì)也進入到高爾基體中，在高爾基體中進一步加工成成熟的蛋白質(zhì)，高爾基體膜也突起形成小泡，小泡離開高爾基體，轉(zhuǎn)移到細胞膜上，小泡中物質(zhì)釋放到細胞膜外．因此放射性物質(zhì)在細胞器中出現(xiàn)的先后順序是核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體．
故答案為：
（1）注射特定抗原        既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體
（2）滅活的病毒         3      雜交瘤細胞
（3）使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）
（4）維持培養(yǎng)液的pH       小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)
（5）核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體

點評 本題以單克隆抗體制備流程階段示意圖為載體，考查單克隆抗體制備的過程，動物細胞培養(yǎng)的條件，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運用所學(xué)知識，對生物學(xué)問題作出準確的判斷，難度適中．