Question

【題目】蘇云金桿菌(Bt)能產(chǎn)生具有殺蟲(chóng)能力的毒素蛋白。圖1是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的重組DNA形成過(guò)程示意圖；圖2是毒素蛋白基因進(jìn)入植物細(xì)胞后發(fā)生的兩種生物大分子合成的過(guò)程，據(jù)圖回答下列問(wèn)題。

（1）將圖1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應(yīng)管中有_____種DNA片段。過(guò)程②需要用到DNA連接酶，與T4 DNA連接酶相比，E.coli DNA連接酶在作用上的不同是________________

（2）圖1中形成重組質(zhì)粒時(shí)可用HindⅢ和BamH Ⅰ進(jìn)行切割后連接，與用一種酶（BamH Ⅰ）酶切后連接相比，這樣做的好處是______________________________。（列出2點(diǎn)）

（3）圖2中鏈?zhǔn)?/span>______。不同組織細(xì)胞的相同DNA進(jìn)行過(guò)程③時(shí)啟用的起始點(diǎn)______（“都相同”、“都不同”、“不完全相同”），其原因是__________________。

（4）要想檢測(cè)Bt毒蛋白基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，在分子水平上可用______法進(jìn)行檢測(cè)。

Answer 1

【答案】4種，E.coli DNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的粘性末端連接起來(lái) 防止目的基因或質(zhì)粒自連 防止目的基因和質(zhì)粒的任意連接 mRNA 不完全相同 不同組織細(xì)胞中基因會(huì)進(jìn)行選擇性表達(dá) 抗原-抗體雜交

【解析】

本題以轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過(guò)程示意圖為載體，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題，屬于中等難度題。1.由于HindⅢ與BamHⅠ兩種限制酶酶切形成的黏性末端不一樣，圖中①中的DNA同時(shí)被這兩種限制酶切割后產(chǎn)生四種基因片段；2.圖2表示基因的表達(dá)，DNA轉(zhuǎn)錄形成信使RNA（α鏈），翻譯形成多肽鏈。

（1）圖中①的DNA含有兩個(gè)BamHⅠ酶的切割位點(diǎn)，含有一個(gè)HindⅢ酶的切割位點(diǎn)，所以用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切①中的DNA后，反應(yīng)管中有4種DNA片段，與T4DNA連接酶相比，E.coli DNA連接酶在作用上的不同是E.coli DNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的粘性末端連接起來(lái)。
（2）形成重組質(zhì)粒時(shí)可用HindⅢ和BamHⅠ進(jìn)行切割后連接，與用一種酶（BamHⅠ）酶切后連接相比，可以防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因和質(zhì)粒的任意連接。
（3）從圖2可知，a鏈形成是以DNA一條鏈作為模板進(jìn)行轉(zhuǎn)錄形成的信使RNA分子；不同組織細(xì)胞的相同DNA在轉(zhuǎn)錄時(shí)，如果是相同基因一般轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)相同，不同的基因轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)不同，原因是基因的選擇性表達(dá)。
（4）要想檢測(cè)Bt毒蛋白基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，在分子水平上可用抗原-抗體雜交。