Question

【題目】某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，不小心把圓褐固氮菌和酵母菌混在一起。該同學(xué)設(shè)計(jì)下面的實(shí)驗(yàn)，分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌。

（1）實(shí)驗(yàn)原理：圓褐固氮菌是自生固氮菌，能在無氮培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)繁殖而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌等真菌的生長(zhǎng)繁殖，而會(huì)抑制圓褐固氮菌的生長(zhǎng)繁殖。

（2）材料用具：（略）

（3）實(shí)驗(yàn)步驟

①制備兩種培養(yǎng)基，將兩種培養(yǎng)基各自分成兩份，依次標(biāo)號(hào)A、a和B、b。

②____________________________________，并在25℃條件下培養(yǎng)_____天。

③分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長(zhǎng)良好的菌并分別接種到a、b培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)3～4天。

（4）請(qǐng)問答

①對(duì)新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是_________________。

②本實(shí)驗(yàn)中，配制的分離用的培養(yǎng)基成分特點(diǎn)：A、a是_____培養(yǎng)基，B、b是_______培養(yǎng)基，根據(jù)上述原理配制的培養(yǎng)基屬于_____培養(yǎng)基。

③根據(jù)所需目的配制上述培養(yǎng)基時(shí)除營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)外還應(yīng)注意_________。

④實(shí)驗(yàn)步驟中第③步的目的是___________。

⑤圓褐固氮菌與酵母菌在結(jié)構(gòu)上的主要差異為______________。

⑥青霉素抑制圓褐固氮菌等細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖，其作用機(jī)理是破壞或抑制其細(xì)胞壁的形成。請(qǐng)據(jù)此推測(cè)不影響酵母菌等真菌生長(zhǎng)繁殖的原因是______________。

Answer 1

【答案】分別在A、B培養(yǎng)基上接種等量的混合的微生物 3～4 高壓蒸汽滅菌鍋 無氮 含青霉素的 選擇 pH要適宜 分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌 圓褐固氮菌無成形的細(xì)胞核 細(xì)菌細(xì)胞壁和真菌細(xì)胞壁的化學(xué)組成不同

【解析】

微生物分離的基本步驟為配制培養(yǎng)基、接種、培養(yǎng)篩選等。培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動(dòng)物（或組織）生長(zhǎng)繁殖的，由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多，根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等；根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié)pH，還需進(jìn)行滅菌，通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，易被污染或變質(zhì)。選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某理化因素抗性的原理而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。具有只允許特定的微生物生長(zhǎng)，而同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)的功能。

（3）②培養(yǎng)基配制好以后需要將菌種接種在上面培養(yǎng)。一般培養(yǎng)3～4天可以看到菌落。

（4）①用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)新配制的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。

②圓褐固氮菌能在無氮培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)繁殖而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌等真菌的生長(zhǎng)繁殖，而會(huì)抑制圓褐固氮菌的生長(zhǎng)繁殖。故一個(gè)培養(yǎng)基中不含氮（圓褐固氮菌生長(zhǎng)），一個(gè)培養(yǎng)基中含青霉素（酵母菌生長(zhǎng)）。這兩類培養(yǎng)基都屬于選擇培養(yǎng)基。

③培養(yǎng)基的pH要適宜。

④實(shí)驗(yàn)步驟中第③步轉(zhuǎn)到新的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，目的是分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌。

⑤圓褐固氮菌（細(xì)菌）與酵母菌（真菌）在結(jié)構(gòu)上的主要差異為圓褐固氮菌無成形的細(xì)胞核。

⑥細(xì)菌細(xì)胞壁的成分主要是肽聚糖，真菌細(xì)胞壁的成分主要是殼多糖。