Question

【題目】科研人員將擬南芥GolS2基因?qū)�入水稻體內(nèi)后，設(shè)法使該基因過(guò)量表達(dá)，產(chǎn)生了較多的糖類(lèi)化合物，從而大大提升了植株的抗旱能力�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）用_________________技術(shù)可以在體外大量合成擬南芥GolS2基因。

（2）科學(xué)家設(shè)法使GolS2基因在水稻體內(nèi)過(guò)量表達(dá)，是科學(xué)家對(duì)運(yùn)載體上的_______進(jìn)行修飾的結(jié)果，該組件的功能：__________________________。

（3）為使GolS2基因整合到水稻染色體上，常將目的基因拼接到___________上，然后再通過(guò)______________方法獲得穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因水稻。

（4）細(xì)胞內(nèi)糖類(lèi)化合物含量增多就能提高抗旱能力，原因是_______________________。

（5）對(duì)導(dǎo)入了基因表達(dá)載體的細(xì)胞需進(jìn)行組織培養(yǎng)，誘使細(xì)胞脫分化時(shí)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，另外還需滿足的條件為________________________。

Answer 1

【答案】PCR 啟動(dòng)子 是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄 Ti-質(zhì)粒 自交（然后篩選） 細(xì)胞液濃度增加，可大大提高根細(xì)胞的吸水（或保水）能力 離體、植物激素調(diào)節(jié)、適宜的溫度和pH

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）用PCR技術(shù)可以在體外大量合成擬南芥GolS2基因。

（2）GolS2基因的表達(dá)離不開(kāi)啟動(dòng)子的驅(qū)動(dòng)，啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。

（3）Ti-質(zhì)粒上存在T-DNA，將目的基因插入T-DNA片段中，可使目的基因很容易轉(zhuǎn)移到染色體上。然后通過(guò)自交的方法使基因純合，但是需要淘汰不合要求的個(gè)體，直至不發(fā)生性狀分離為止。

（4）細(xì)胞內(nèi)GolS2基因的過(guò)量表達(dá)，使得細(xì)胞內(nèi)糖類(lèi)增多，增加了細(xì)胞液的濃度，進(jìn)而使細(xì)胞吸水或保水能力增加。

（5）對(duì)導(dǎo)入了基因表達(dá)載體的細(xì)胞需進(jìn)行組織培養(yǎng)，誘使細(xì)胞脫分化時(shí)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，另外還需滿足的條件為離體、植物激素調(diào)節(jié)、適宜的溫度和pH。