Question

19．馬鈴薯塊莖含有大量的淀粉，富含多種維生素和無機(jī)鹽，我國已將馬鈴薯作為主糧產(chǎn)品進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化開發(fā)．圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯的培育過程，請分析回答問題：
（1）為獲取抗鹽基因，可以從堿蓬細(xì)胞研磨液中提取抗鹽基因的mRNA來合成cDNA．
（2）如圖構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，最好選用EcoRⅠ和HindⅢ酶切割含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒，不能使用Smal切割的原因是SamⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因．構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段．
（3）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA上的原因是T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA（T-DNA能攜帶目的基因整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上）．通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細(xì)胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)．
（4）如圖轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯培育過程中，屬于脫分化階段的是⑤（填序號）．從個(gè)體水平上檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯的培育過程，其中①表示獲取目的基因的過程，②表示切割質(zhì)粒的過程，③表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，④表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，⑤表示脫分化過程，⑥表示再分化過程．

解答 解：（1）獲取目的基因時(shí)，可以以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA．
（2）用SamⅠ酶切割會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因，因此構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)不能用SamⅠ酶；因此，為了防止目的基因或質(zhì)粒自身環(huán)化，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，最好選用EcoRⅠ和HindⅢ酶切割含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒．啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，是RNA聚合酶結(jié)合的部位．
（3）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA上的原因是T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA（T-DNA能攜帶目的基因整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上）．通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細(xì)胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)．
（4）圖中⑤屬于脫分化階段．從個(gè)體水平上檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長．
故答案為：
（1）mRNA
（2）EcoRⅠ和HindⅢSamⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因       DNA
（3）T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA（T-DNA能攜帶目的基因整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上）       穩(wěn)定維持和表達(dá)
（4）⑤將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．