Question

【題目】小鼠是繼果蠅之后的又一種模式動(dòng)物，下圖1表示生產(chǎn)長(zhǎng)效胰島素轉(zhuǎn)基因小鼠培育過程示意圖，圖2表示圖1中③表達(dá)載體構(gòu)建過程圖示。請(qǐng)回答下列問題：

（1）圖1中的過程①注射A物質(zhì)的目的是使供體母鼠 ， 若進(jìn)行體外受精，則需將未成熟的卵子培養(yǎng)至才具備受精能力。
（2）在圖2中，當(dāng)目的基因的DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反應(yīng)管中有種DNA片段，經(jīng)過程⑧形成的重組質(zhì)粒上將有限制酶的切點(diǎn)。
（3）為確保目的基因在小鼠細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，圖2的⑧過程在構(gòu)建基因的表達(dá)載體時(shí)，需將目的基因插在兩種片段之間，將表達(dá)載體送入細(xì)胞時(shí)，圖1中的過程④常用的方法是。
（4）為檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)，通常采用的方法是。

Answer 1

【答案】
（1）超數(shù)排卵；減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ中期）
（2）4；HindⅢ（或1種）
（3）啟動(dòng)子、終止子；顯微注射
（4）抗原-抗體雜交
【解析】（1）分析題圖可知，過程①注射的激素是促性腺激素，目的是促進(jìn)良種母畜超數(shù)排卵；體外受精時(shí)，要將未成熟的卵子培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ中期）才具備受精能力。（2）在圖2中，目的基因的DNA含有1個(gè)HindⅢ切割位點(diǎn)，2個(gè)BamhⅠ切割位點(diǎn)，因此該目的基因DNA用HindⅢ、BamhⅠ完全酶切后反應(yīng)管中有4種DNA片段；目的基因是用限制酶HindⅢ、BamhⅠ切割獲得的，而質(zhì)粒是用限制酶HindⅢ、BclⅠ切割的，由于BamhⅠ和BclⅠ切割形成的黏性末端相同，因此目的基因和質(zhì)粒可經(jīng)DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒，但重組質(zhì)粒上有HindⅢ（或1種）的切點(diǎn)，沒有BamhⅠ和BclⅠ切點(diǎn)（3）為確保目的基因在小鼠細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，圖2的⑧過程在構(gòu)建基因的表達(dá)載體時(shí)，需將目的基因插在啟動(dòng)子、終止子兩種片段之間；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法。 （4）若目的基因成功表達(dá)，細(xì)胞中會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)，通常采用抗原-抗體雜交法進(jìn)行鑒定。
【考點(diǎn)精析】利用基因工程的原理及技術(shù)對(duì)題目進(jìn)行判斷即可得到答案，需要熟知基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)．