Question

18．人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷．如圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請(qǐng)分析回答：

（1）制備單克隆抗體過程中要用到動(dòng)物細(xì)胞的融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)．
（2）在B淋巴細(xì)胞內(nèi)DNA合成有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤所阻斷．而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成沒有S途徑．
①利用DNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的HAT培養(yǎng)基含有多種成分，其中添加的氨基嘌呤成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用．
②最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
③培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的條件包括：無菌、無毒的環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)、溫度、氣體環(huán)境．
（3）哺乳動(dòng)物在懷孕初期能為胚胎的收集提供可能，這是因?yàn)椴溉閯?dòng)物的早期胚胎形成后，在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)，沒有與母體子宮建立組織上的聯(lián)系；在胚胎移植技術(shù)中收集到胚胎后要進(jìn)行檢查、培養(yǎng)或保存以及移植后的檢查等步驟；胚胎移植時(shí)可利用激素對(duì)受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，使受體處于適合的生理狀況；此外，受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能．
（4）為了更多地生產(chǎn)出人HCG，有人構(gòu)思采用胚胎分割技術(shù)，把一個(gè)胚胎分割成很多很多份數(shù)，進(jìn)而培育出大量相同的轉(zhuǎn)基因牛．你認(rèn)為這種方法可行嗎？為什么？不可行，因?yàn)榕咛シ指畹姆輸?shù)越多，操作難度會(huì)越大，移植的成功率也越低．

Answer 1

分析 1．制備單克隆抗體的誘導(dǎo)過程有：正常小鼠免疫處理、動(dòng)物細(xì)胞的融合（物、化、生法）、雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)、專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的提純．
2．單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體．
3．二次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．
4．雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理．通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染．此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害．②營(yíng)養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等．通常需加入血清、血漿等天然成分．③溫度：適宜溫度：哺乳動(dòng)物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4．④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO₂．O₂是細(xì)胞代謝所必需的，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．

解答 解：（1）制備單克隆抗體的誘導(dǎo)過程有：正常小鼠免疫處理、動(dòng)物細(xì)胞的融合、雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)、專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的提純．要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)．
（2）①氨基嘌呤可以阻斷在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA．因此配制的HAT培養(yǎng)基中添加氨基嘌呤的成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用．
 ②雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
③培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的條件包括：無菌、無毒的環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)、溫度和氣體環(huán)境．
（3）哺乳動(dòng)物的早期胚胎形成后，在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)，沒有與母體子宮建立組織上的聯(lián)系，這樣為胚胎的收集提供了可能．在胚胎移植技術(shù)中，收集到胚胎后要先進(jìn)行檢查、培養(yǎng)或保存，然后再進(jìn)行移植，以及移植后的檢查等步驟．胚胎移植時(shí)可利用激素對(duì)受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，使受體處于適合的生理狀況；此外，受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能．
（4）胚胎分割的份數(shù)越多，操作難度會(huì)越大，移植的成功率也越低，所以該方法不可行．
故答案為：
（1）動(dòng)物細(xì)胞的融合  動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
（2）①氨基嘌呤  ②既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體  
③哺乳動(dòng)物的早期胚胎形成后，在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)，沒有與母體子宮建立組織上的聯(lián)系  檢查  培養(yǎng)或保存   同期發(fā)情   免疫排斥 
（4）不可行   因?yàn)榕咛シ指畹姆輸?shù)越多，操作難度會(huì)越大，移植的成功率也越低

點(diǎn)評(píng) 本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植和胚胎分割的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程及條件；識(shí)記胚胎移植的過程，理解胚胎分割的特點(diǎn)，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．