【題目】圖1表示含有目的基因D的DNA片段長(zhǎng)度(bp即堿基對(duì))和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列,F(xiàn)有Msp I、BamH I、Mbo I、Sma I4種限制性核酸內(nèi)切酶,它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請(qǐng)回答下列問(wèn)題
(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由___________連接。
(2)若用限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段,其產(chǎn)物長(zhǎng)度為_(kāi)_____________________。
(3)若圖1中虛線(xiàn)方框內(nèi)的堿基對(duì)被T-A堿基對(duì)替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子中分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,產(chǎn)物中共有___________種不同長(zhǎng)度的DNA片段。
(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過(guò)同種限制酶處理后進(jìn)行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是______________________。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加______________________的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
【答案】(1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖
(2)523bp、724bp、643bp
(3)4
(4)BamH I 抗生素B
【解析】
試題分析:(1)一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖連接。
(2)限制酶SmaⅠ的酶切位點(diǎn)是CCC↓GGG,其切割產(chǎn)生的是平末端.圖1中DNA片段含有兩個(gè)SmaⅠ酶切位點(diǎn),被SmaⅠ酶完全切割后出現(xiàn)三個(gè)長(zhǎng)度的片段,分別是537bp、790bp、661bp。
(3)雜合子的基因型為Dd,其中D基因片段有兩個(gè)SmaⅠ酶切位點(diǎn),完全切割后出現(xiàn)三個(gè)片段長(zhǎng)度分別是537bp、790bp、661bp,發(fā)生基因突變后的d基因片段只有一個(gè)SmaⅠ酶切位點(diǎn),完全切割后出現(xiàn)兩個(gè)片段長(zhǎng)度分別是1327bp、661bp,所以從雜合子中分離的DNA片段被限制酶SmaⅠ完全切割后形成會(huì)四種不同的DNA片段.
(4)基因表達(dá)載體構(gòu)建的過(guò)程中需要利用限制酶和DNA連接酶.限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因D上,若用這兩種酶切割會(huì)被破壞目的基因D;運(yùn)載體的兩個(gè)標(biāo)記基因上都有限制酶MboⅠ的切割位點(diǎn),用該酶切割會(huì)破壞這兩個(gè)標(biāo)記基因,因此只能選用限制酶BamHⅠ切割外源DNA分子和運(yùn)載體.用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒會(huì)破壞抗生素A抗性基因,但不會(huì)破壞抗生素B抗性基因,所以導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌能在含有抗生素B的培養(yǎng)基上生存,因此為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加抗生素B的培養(yǎng)基培養(yǎng)。
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B.胰腺分泌的胰液進(jìn)入小腸能消化食物
C.促胰液素可經(jīng)血液到胰腺,促進(jìn)胰液的分泌
D.鹽酸引起胰腺分泌胰液的過(guò)程不包含體液調(diào)節(jié)
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④溶菌薛的空間結(jié)構(gòu)與其功能密切關(guān)系
⑤溶菌酶的殺菌作用屬于特異性免疫
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