Question

9．圖為篩選分解石油烴能力強(qiáng)細(xì)菌的過程，請(qǐng)回答與此有關(guān)的問題：

（1）培養(yǎng)基的配制可以參照牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的配制辦法，即計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板．
（2）分解石油烴的微生物一般要從土壤中分離，獲取土壤樣品的取樣地點(diǎn)最好選在石油污染明顯處．
（3）為了能有效地分離出分解石油烴的微生物，過程①一④所用培養(yǎng)基中需要加入的特殊成分為只含石油烴一種碳源，從而有利于目的菌的生長(zhǎng)，抑制其他微生物的生長(zhǎng)，這樣的培養(yǎng)基可稱做選擇培養(yǎng)基．
（4）④中的培養(yǎng)基從物理特征看屬于固體培養(yǎng)基，這可以通過往培養(yǎng)基中加入一定量的瓊脂來實(shí)現(xiàn)，對(duì)④進(jìn)行接種常采用的兩種方法分別是平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（5）若發(fā)現(xiàn)在⑤中無法區(qū)分菌落，可以將③中取出的菌液進(jìn)行梯度稀釋．

Answer 1

分析 （1）培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽．培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落．

解答 解：（1）牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的配制辦法為：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板．
（2）要獲取相應(yīng)的菌種，應(yīng)到相應(yīng)的環(huán)境中獲取，獲取土壤樣品的取樣地點(diǎn)最好選在石油污染明顯處．
（3）有些培養(yǎng)基可以抑制其他微生物的生長(zhǎng)，這樣的培養(yǎng)基可稱做選擇培養(yǎng)基．因此，為了能有效地分離出分解石油烴的微生物，過程①一④所用培養(yǎng)基，其成分的特點(diǎn)是只含石油烴一種碳源，從而有利于目的菌的生長(zhǎng)，抑制其他微生物的生長(zhǎng)．
（4）配置好的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進(jìn)行．
（5）④中的培養(yǎng)基從物理特征看屬于固體培養(yǎng)基，可加入凝固劑瓊脂處理，常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（6）若發(fā)現(xiàn)無法區(qū)分菌落，說明稀釋度不夠，可以將重新進(jìn)行梯度稀釋．
故答案為：
（1）溶化
（2）石油污染明顯處       
（3）只含石油烴一種碳源      目的菌    選擇
（4）固體       瓊脂       平板劃線法      稀釋涂布平板法
（5）進(jìn)行梯度稀釋

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握微生物培養(yǎng)過程中的無菌技術(shù)，識(shí)記分離微生物的常用的接種方法和接種工具，能夠結(jié)合題干信息即題圖分析作答．