分析 根據(jù)圖示可知,含有重組質粒的大腸桿菌能在四環(huán)素培養(yǎng)基中生存,但不能在青霉素培養(yǎng)基中生存,可知切割質粒時應選用的酶是限制酶PstI,破壞了青霉素抗性基因.甲、丙培養(yǎng)基中含有四環(huán)素,因此能在甲和丙中生長的大腸桿菌含有四環(huán)素抗性基因,包括導入普通質粒和重組質粒的大腸桿菌;乙培養(yǎng)基中含有四環(huán)素和青霉素,因此能在乙中生長的是導入普通質粒的大腸桿菌.與丙相比,乙培養(yǎng)基中少了兩個菌落,說明丙培養(yǎng)基中這兩個菌落中的大腸桿菌成功導入了重組質粒.
解答 解:(1)由分析可知,破壞的是青霉素抗性基因,所以用限制酶PstI,而且要保證目的基因和質粒定向連接,所以不能形成相同的黏性末端,故另一種酶選EcoRI酶,將目的基因與運載體連接需要DNA連接酶.
(2)將目的基因導入微生物細胞,常用CaCl2 處理,使之成為感受態(tài)細胞.由于質粒中含有青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因,而青霉素抗性基因已經被破壞,所以受體細胞大腸桿菌中不應含有四環(huán)素抗性基因,以便于用篩選.
(3)甲培養(yǎng)基中含有四環(huán)素,所以培養(yǎng)的是獲得含有四環(huán)素抗性基因的大腸桿菌.
(4)人的皮膚細胞內存在生長激素基因,但由于基因的選擇性表達,人的皮膚細胞內不能合成生長激素mRNA,所以不能用人的皮膚細胞完成①過程.
故答案為:
(1)PstⅠ、EcoRⅠ、
目的基因需要PstⅠ切割,而PstⅠ破壞了抗安卡青霉素基因,同時HindⅢ酶能破壞另一個抗性基因,所以不能用HindⅢ酶切割目的基因.
DNA連接酶
(2)Ca2+ 抗四環(huán)素基因
(3)含四環(huán)素抗性基因的受體細胞
(4)不能,因為人的皮膚細胞不表達人生長素基因,沒有人生長素基因的mRNA
點評 本題考查了基因工程和微生物培養(yǎng)的相關知識,考生要能夠通過菌落培養(yǎng)的情況確定重組質粒中破壞的抗性基因,進而確定使用的限制酶,要求考生具有一定的析圖能力和理解判斷能力,難度適中.
科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 用斐林試劑鑒定還原糖時,可觀察到溶液變成紫色 | |
B. | 用雙縮脲試劑鑒定蛋清中的蛋白質時,可觀察到溶液變成磚紅色 | |
C. | 觀察酵母菌種群數(shù)量變化時,被亞甲基藍溶液染成藍色的是活酵母菌 | |
D. | 觀察紫色洋蔥表皮細胞發(fā)生質壁分離現(xiàn)象時,液泡顏色由淺變深 |
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 用對比實驗法探究酵母菌細胞的呼吸方式 | |
B. | 在葉綠體色素的提取和分離實驗中,用無水乙醇作為有機溶液分離色素 | |
C. | 在探究酵母菌種群數(shù)量變化的實驗中,需要設置空白對照進行比較 | |
D. | 用標志重捕法和取樣器取樣法可分別調查跳蝻的種群密度和土壤動物的豐富度 |
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 胰島素從胰島B細胞釋放到細胞外的方式是胞吐 | |
B. | 葡萄糖進入骨骼肌細胞的運輸方式是主動運輸,胰島素能加速骨骼肌細胞攝取葡萄糖 | |
C. | 當血糖濃度上升時,胰島素分泌量應增加,此時骨骼肌細胞葡萄糖轉運載體也會增加 | |
D. | 脂肪細胞也是胰島素作用的靶細胞 |
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 圖中反映了細胞膜具有細胞間信息交流的功能 | |
B. | 圖中乙表示靶細胞 | |
C. | 圖中a表示信號分子(如激素) | |
D. | 圖中b表示細胞膜上的載體 |
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