Question

[生物--選修3現(xiàn)代生物科技專題]
豬的基因和人類的基因存在一定的相似度．據(jù)報道經(jīng)特殊處理的豬皮可在人身上存活3周左右，起保護創(chuàng)面免受感染的作用．移植豬皮后，還要在豬皮上開很多小口，在小口處植入患者的自體皮膚組織，自體皮膚慢慢生長，逐漸覆蓋原先創(chuàng)面，而豬皮最終會掉光．為了使移植的豬皮存活更長時間，有人設(shè)法導(dǎo)入人的相關(guān)基因（用P表示），獲得轉(zhuǎn)基因小白豬．其簡要流程如圖所示：

據(jù)圖中信息并結(jié)合課本知識回答：
（1）過程①中形成重組研蛆常用的酶有限制性核酸內(nèi)切酶和

 

；將目的基因?qū)�入成纖維細胞常用的方法是

 

．
（2）過程②中，常用

 

酶處理，將皮膚組織塊分散戍單個成纖維細胞．在培養(yǎng)成纖維細胞時需要滿足的條件是無菌、無毒、通氣、適宜的溫度、pH以及

 

．
（3）圖中的卵母細胞應(yīng)在體外培養(yǎng)到

 

，并作除去細胞核的處理；過程③中所用的技術(shù)是

 

；能代替圖中卵母細胞的還可以是

 

．
（4）圖示技術(shù)除可用于器官移植外，還用于

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),動物細胞與組織培養(yǎng)過程,動物細胞核移植技術(shù)

專題：

分析：根據(jù)圖示，可知①是基因表載體的構(gòu)建、②是動物細胞培養(yǎng)、③是早期胚胎培養(yǎng)．
通過核移植技術(shù)形成重組細胞，首先對供體用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵；另需要將卵母細胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才可以去核．
動物細胞培養(yǎng)基含有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)，另外需要無菌和無毒的環(huán)境．

解答： 解：（1）在構(gòu)建表達載體時，要用同一種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，使質(zhì)粒和目的基因產(chǎn)生相同的末端，再用DNA連接酶連接成重組質(zhì)粒．受體細胞是動物細胞，可以通過顯微注射法將目的基因轉(zhuǎn)化入受體細胞．
（2）動物細胞培養(yǎng)時，取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織），用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞．動物細胞培養(yǎng)需要在無菌、無毒的環(huán)境、營養(yǎng)物質(zhì)充沛、適宜的溫度和PH、氣體環(huán)境等條件．
（3）卵母細胞應(yīng)在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期（或MII中期），并作除去細胞核的處理；過程③中所用的技術(shù)是（早期）胚胎體外培養(yǎng)；能代替圖中卵母細胞的還可以是去核的受精卵（或去核的卵細胞）．
（4）圖示技術(shù)除可用于器官移植外，還用于培育并繁殖優(yōu)良品種家畜；作為生物反應(yīng)器生成醫(yī)藥蛋白等．
故答案為：
（1）DNA連接酶      顯微注射法
（2）胰蛋白（或膠原蛋白）      營養(yǎng)
（3）減數(shù)第二次分裂中期（或MII中期）     （早期）胚胎體外培養(yǎng)     去核的受精卵（或去核的卵細胞）
（4）培育并繁殖優(yōu)良品種家畜；作為生物反應(yīng)器生成醫(yī)藥蛋白等

點評：本題綜合考查了細胞工程、胚胎工程和基因工程的相關(guān)知識，考生要識記基因工程的操作工具；掌握目的基因檢測和鑒定的方法；識記動物細胞培養(yǎng)的過程和培養(yǎng)條件等；明確卵母細胞在進行細胞核移植前的準(zhǔn)備；識記胚胎工程和基因工程的相關(guān)應(yīng)用．