Question

補充正常凝血因子F8可以治療甲型血友病，因此可以利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)人工生產(chǎn)F8．
某種大腸桿菌的質(zhì)粒中含有β-半乳糖苷酶α片段序列（圖2），大腸桿菌的DNA分子中則含有β-半乳糖酶ω片段序列（圖1），由于天然大腸桿菌同時具備這兩種片段序列，可以使培養(yǎng)基中含有X-gal底物轉(zhuǎn)變成藍(lán)色產(chǎn)物，當(dāng)缺少任意一個α或ω片段序列，X-gal底物不能轉(zhuǎn)變成藍(lán)色產(chǎn)物．HindⅢ、EcoRI、BamHI分別為三種限制性內(nèi)切酶，如圖3中箭頭所指為三種限制酶的切點．

（1）要能篩選出轉(zhuǎn)基因菌種，應(yīng)選用的限制性內(nèi)切酶是

 

，選擇的依據(jù)是

 

（2）限制酶作用于DNA的部位是

 

A．氫鍵           B．糖苷鍵          C．磷酸二酯鍵          D．肽鍵
（3）控制F8的基因也可以通過人體細(xì)胞相應(yīng)的mRNA來合成，該合成的過程稱為

 

．
將經(jīng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)處理過的質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌后，再將大腸桿菌接種到含有X-gal底物的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)較多的藍(lán)色菌落，這是因為

 

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Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：當(dāng)大腸桿菌缺少任意一個α或ω片段序列，X-gal底物不能轉(zhuǎn)變成藍(lán)色產(chǎn)物，所以要破壞質(zhì)粒中的α片段序列（含兩個酶切位點：HindⅢ、EcoRI），利用X-gal底物來檢測目的基因是否轉(zhuǎn)入大腸桿菌．質(zhì)粒和外源DNA分子都含有HindⅢ、EcoRI、BamHI三種限制性內(nèi)切酶的切割位點，但HindⅢ位于目的基因上，所以不能用該酶切割獲取目的基因．所以應(yīng)選用的限制性內(nèi)切酶 EcoRI切割外源DNA和質(zhì)粒．

解答： 解：（1）當(dāng)大腸桿菌缺少任意一個α或ω片段序列，X-gal底物不能轉(zhuǎn)變成藍(lán)色產(chǎn)物，所以要破壞質(zhì)粒中的α片段序列（含兩個酶切位點：HindⅢ、EcoRI），利用X-gal底物來檢測目的基因是否轉(zhuǎn)入大腸桿菌．質(zhì)粒和外源DNA分子都含有HindⅢ、EcoRI、BamHI三種限制性內(nèi)切酶的切割位點，但HindⅢ位于目的基因上，所以不能用該酶切割獲取目的基因．所以應(yīng)選用的限制性內(nèi)切酶EcoRI切割外源DNA和質(zhì)粒．
（2）限制酶作用于DNA分子的磷酸二酯鍵，使DNA分子斷裂．
（3）通過mRNA來合成基因的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄；由于用同一種限制酶作用的目的基因、質(zhì)粒具有相同的黏性末端，因此會出現(xiàn)質(zhì)粒的自我環(huán)化的空載現(xiàn)象，空載質(zhì)粒含有完整的α、ω片段序列，能利用培養(yǎng)基中的X-gal底物產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物．
故答案為：
（1）EcoRI     切斷α片段序列，為重組DNA分子的篩選提供標(biāo)記
（2）C     
（3）逆（反）轉(zhuǎn)錄    同一種限制酶作用的目的基因、質(zhì)粒具有相同的粘性末端，因此會出現(xiàn)質(zhì)粒的自我環(huán)化的空載現(xiàn)象，空載質(zhì)粒含有完整的α、ω片段序列，能利用培養(yǎng)基中的X-gal底物產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物．

點評：本題以正常凝血因子F8為素材，考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生分析題圖提取有效信息的能力；識記能力和能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運用所學(xué)知識，解決生物學(xué)問題的能力．