Question

【題目】存在于土壤中的脂環(huán)酸芽孢桿菌需氧，耐熱，生長溫度35-70℃。橙汁生產(chǎn)過程中若感染脂環(huán)酸芽孢桿菌，會影響橙汁的品質(zhì)，導致巨大的經(jīng)濟損失。為優(yōu)化橙汁生產(chǎn)的質(zhì)量監(jiān)控工藝，進行下述研究。

（實驗一：脂環(huán)酸芽孢桿菌的篩選和鑒定）

實驗步驟：①配制K氏培養(yǎng)基;

②取果園土壤，制備土壤稀釋液；

③將土壤稀釋液接種在K氏培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)后獲得單菌落。

④對獲得的菌落進行篩選和鑒定。

（1）K氏培養(yǎng)基的主要成分有酵母膏、蛋白胨和葡萄糖等，其中能提供生長因子的成分是______________。

（2）將分離得到的可疑菌株制成菌懸液，于80℃水浴中熱處理10min，再取0.1mL熱處理后的菌液涂布接種到K氏培養(yǎng)基平板上，45℃培養(yǎng)48h。此操作過程的目的是_____。

A．用80℃水浴殺死雜菌和芽孢 B．分離純化目標菌株

C．用80℃水浴篩選出耐熱菌株 D．給細菌補充新的營養(yǎng)物質(zhì)

（3）用接種環(huán)將篩得的菌株插入到半固體培養(yǎng)基（瓊脂含量3.5g/L）中（如圖），45℃培養(yǎng)4-5天后進行觀察，能夠判斷是脂環(huán)酸芽孢桿菌生長的試管是______。

（實驗二：脂環(huán)酸芽孢桿菌控制方法的研究）

實驗步驟：

①稱取一定量的抑菌劑，配制成不同濃度的抑菌液。

②將實驗一得到的菌株原液稀釋成一定濃度。

③分別取不同濃度的抑菌液和菌株稀釋液，加入到K氏培養(yǎng)液中形成菌懸液（三種液體均為等量）。培養(yǎng)一段時間后，將上述菌懸液分別接種到K氏培養(yǎng)基平板上。

（4）實驗二中，對照組的設置應該是_________________________________。

（5）為便于檢測抑菌劑的抑菌效果，宜采用哪種接種方法？為什么？_____________________________。

Answer 1

【答案】酵母膏、蛋白胨 BC D 等量的無菌水+等量的菌株稀釋液 涂布法 因為通過計算涂布法培養(yǎng)得到的菌落，可以反映抑菌劑的抑菌效果

【解析】

1．培養(yǎng)基的概念、種類及營養(yǎng)構成
（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)；

（3）營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

2、微生物分離和純化的方法：
①平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面；
②稀釋涂布平板法：將駿業(yè)進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。

（1）K氏培養(yǎng)基的主要成分有酵母膏、蛋白胨和葡萄糖等，其中能提供生長因子的成分是酵母膏、蛋白胨，而葡萄糖是為培養(yǎng)的微生物提供能量。

（2）80℃水浴條件下一般微生物不能存活，能存活的微生物都是耐受的了80℃高溫，再取0.1mL熱處理后的菌液涂布接種到K氏培養(yǎng)基平板上，45℃培養(yǎng)48h分離純化耐熱菌株，綜上所述BC正確，AD錯誤。

故選BC。

（3）通過題干信息可知，脂環(huán)酸芽孢桿菌是需氧型微生物，故脂環(huán)酸芽孢桿菌生長的試管是D。

（4）根據(jù)單一變量原則，實驗二中，對照組的設置應該是等量的無菌水+等量的菌株稀釋液。

（5）因為通過計算涂布法培養(yǎng)得到的菌落，可以反映抑菌劑的抑菌效果，故為便于檢測抑菌劑的抑菌效果，宜采用稀釋涂布法。