Question

根據(jù)基因工程的有關知識,回答下列問題:

(1)限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段,其末端類型有 和 。

(2)質(zhì)粒運載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下:

AATTC……G

G……CTTAA

為使運載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點是 。

(3)按其來源不同,基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類,即 DNA連接酶和 DNA連接酶。

(4)反轉錄作用的模板是 ,產(chǎn)物是 。若要在體外獲得大量反轉錄產(chǎn)物,常采用 技術。

(5)基因工程中除質(zhì)粒外, 和 也可作為運載體。

(6)若用重組質(zhì)粒轉化大腸桿菌,一般情況下,不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞,原因是  。

 

Answer 1

(1)黏性末端 平末端

(2)切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的黏性末端相同

(3)大腸桿菌(E·coli) T4 (4)mRNA(或RNA) cDNA(或DNA) PCR (5)噬菌體 動植物病毒 (6)未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱

【解析】(1)當限制酶在它識別序列的中心軸線兩側將DNA的兩條鏈分別切開時,產(chǎn)生的是黏性末端,而當限制酶在它識別序列的中心軸線處切開時,產(chǎn)生的則是平末端。(2)為使運載體與目的基因相連,不同的限制酶應切割出相同的黏性末端,它們必須要能識別相同的核苷酸序列,并且使每條鏈中相同的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。(3)根據(jù)酶的來源不同,DNA連接酶分為兩類:一類是從大腸桿菌中分離得到的,稱為E·coli DNA連接酶;另一類是從T4噬菌體中分離出來的,稱為T4DNA連接酶。(4)反轉錄是以RNA為模板來合成DNA的過程。可以在體外短時間內(nèi)大量擴增DNA的技術叫PCR(多聚酶鏈式反應)。(5)基因工程中除質(zhì)粒外,還有λ噬菌體的衍生物、動植物病毒等。(6)大腸桿菌細胞外有細胞壁和細胞膜,能阻止其他物質(zhì)的進入,可通過Ca2+處理細胞,使細胞處于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),這種細胞稱為感受態(tài)細胞。