【題目】Ⅰ、基因治療是指將外源正;?qū)氚屑毎约m正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病,以達到治療的目的。干擾素基因缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟淋巴細胞,科研人員利用胚胎干細胞對干擾素基因缺失的小鼠進行了基因治療。請回答:

1)為使干擾素基因在小鼠細胞中高效表達,需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達載體的__________________________之間。

2)將干擾素基因?qū)肱咛ジ杉毎毎姆椒ㄊ?/span>_______________,采用_______________可以鑒定目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA分子上,再將能正常表達干擾素的細胞轉(zhuǎn)入到小鼠體內(nèi),這種基因治療方法稱為_______________。

Ⅱ、苦蕎是一種有名的經(jīng)濟植物,其含有的黃酮類化合物具有降血糖、血脂等功效。CHS是合成黃酮類化合物的關(guān)鍵酶。有人把經(jīng)修飾的CHS基因?qū)肟嗍w細胞中,培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系。按圖示回答:

3)過程①中將修飾后的CHS基因與Ti質(zhì)粒連接成重組Ti質(zhì)粒的酶稱為______________。這種酶主要有兩類,一類是從T4噬菌體中分離得到的,另一類是從大腸桿菌中分離得到的,稱為______________。這兩類酶都能恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的______________鍵。

4)圖中將修飾后的CHS基因?qū)肟嗍w體細胞的方法稱為_____________,對過程②操作前,需先用Ca2+處理農(nóng)桿菌,使其成為_____________細胞。

【答案】啟動子 終止子 顯微注射技術(shù) DNA分子雜交 體外基因治療 DNA連接酶 EcoliDNA連接酶 磷酸二酯 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 感受態(tài)

【解析】

基因工程的操作步驟:

1.獲得目的基因(目的基因的獲。

①從自然界中己有的物種中分離出來,如可從基因文庫中獲取。
②用人工的方法合成。
③利用PCR技術(shù)擴增目的基因

2.制備重組DNA分子(基因表達載體的構(gòu)建)

基因表達載體的組成包括:目的基因、標記基因、啟動子、終止子.來自cDNA文庫的基因是通過逆轉(zhuǎn)錄得到的,無啟動子和終止子等,將其插入在表達載體的啟動子和終止子之間才能構(gòu)成完整的基因并在受體細胞內(nèi)表達。

3.轉(zhuǎn)化受體細胞(將目的基因?qū)胧荏w細胞)
將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化技術(shù)(農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法),其次還有基因槍法和花粉管通道技術(shù)(花粉管通道法)。

將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛S玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)。此方法的受休細胞多為受精卵;將目的基因?qū)胛⑸锛毎?/span> Ca2+處理法。
4.目的基因的檢測與鑒定
①首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。

②其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,方法是采用分子雜交技術(shù)。

③最后檢測目的基因是翻譯成蛋白質(zhì),方法是采用抗原一抗體雜交技術(shù)。

④講行個休生物學鑒定。

1)由分析可知,只有把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達載體的啟動子和終止子之間,干擾素基因才能在小鼠細胞中高效表達。

2)由分析可知,通常情況下,將目的基因?qū)雱游锛毎姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù),故應(yīng)該用顯微注射技術(shù)將干擾素基因?qū)肱咛ジ杉毎毎捎?/span>DNA分子雜交可以鑒定目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA分子上,再將能正常表達干擾素的細胞轉(zhuǎn)入到小鼠體內(nèi),這種基因治療方法稱為體外基因治療。

3)過程①為基因表達載體的構(gòu)建過程,該過程中用DNA連接酶將修飾后的CHS基因與Ti質(zhì)粒連接成重組Ti質(zhì)粒。該酶作用的部位是DNA分子中的磷酸二酯鍵,作用的對象是DNA的片段,即能夠?qū)蓚DNA片段通過重新構(gòu)建磷酸二酯鍵相連,這種酶主要有兩類,一類是從T4噬菌體中分離得到的,另一類是從大腸桿菌中分離得到的,稱為EcoliDNA連接酶。

4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛毎S玫姆椒,故圖中將修飾后的CHS基因?qū)肟嗍w體細胞的方法稱為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,對過程②是將重組質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌的過程,在該操作前,通常先用Ca2+處理農(nóng)桿菌,使其成為感受態(tài)細胞,以提高轉(zhuǎn)化率。

練習冊系列答案
相關(guān)習題

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【題目】癌癥是當前嚴重危害人類健康的重大疾病。研究人員利用與癌細胞在某些方面具有相似性的誘導多能干細胞(iPSC)進行了抗腫瘤的免疫學研究。

1)癌細胞膜表面存在異常的蛋白質(zhì)分子,可作為________激發(fā)機體的_______系統(tǒng)發(fā)揮清除作用。

2)研究人員進行的系列實驗如下:

免疫組小鼠:每周注射1次含失去增殖活性的iPSC懸液,連續(xù)4周;

空白組小鼠:每周注射1次不含失去增殖活性的iPSC的緩沖液,連續(xù)4周。

實驗一:取免疫組和空白組小鼠的血清分別與iPSC、DB7(一種癌細跑)和MEF(一種正常體細胞)混合,檢測三種細胞與血清中抗體的結(jié)合率,結(jié)果見下表:

細胞與抗體的 細胞

結(jié)合率(%

血清

iPSC

DB7

MEF

免疫組

77

82

8

空白組

10

8

9

①比較表中iPSC與兩組小鼠血清作用的結(jié)果可知,免疫組的數(shù)值明顯_______空白組的數(shù)值,說明____________________

②表中DB7細胞和iPSC細胞分別與免疫組小鼠血清作用后的檢測數(shù)據(jù)無明顯差異,說明DB7_________________。

③綜合表中全部數(shù)據(jù),實驗結(jié)果表明_________________。

實驗二:給免疫組和空白組小鼠皮下注射DB7,一周后皮下形成腫瘤. 隨后空白組小鼠腫瘤體積逐漸增大,免疫組小鼠腫瘤體積逐漸縮小。由此推測:iPSC還能刺激機體產(chǎn)生_______免疫,通過_______細胞特異性清除腫瘤細胞。

3)研究人員另取小鼠進行實驗,驗證了實驗二的推測. 如圖為實驗組的實驗過程及結(jié)果示意圖。請在圖中選擇AB填入④處,從CF中選擇字母填入①~③處①_______;②_________;③__________;④______ 。

4)該系列研究潛在的應(yīng)用前景是iPSC可以用于________________

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【題目】將一株長勢良好的綠色植物和一只健康的小鼠置于一個密閉透明玻璃罩中,給予適宜光照,測得T時間內(nèi)玻璃罩內(nèi)氧氣量先增加后不變。下列分析正確的是(

A.T時間內(nèi),玻璃罩內(nèi)CO2的含量將持續(xù)上升

B.T時間內(nèi),玻璃罩內(nèi)植物的干重將持續(xù)下降

C.氧氣量不變時,植物的光合速率等于其細胞呼吸速率

D.氧氣量不變時,植物的凈光合速率等于小鼠的細胞呼吸速率

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【題目】下圖是中心法則示意圖,有關(guān)敘述正確的是

A. 圖中核酸分子的復(fù)制都是邊解旋邊復(fù)制 B. 逆轉(zhuǎn)錄的原料是四種核糖核苷酸

C. 基因的復(fù)制和表達均遵循堿基互補配對原則 D. 上述過程的發(fā)生場所均為細胞核

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【題目】為探究H2O2酶對H2O2分解的影響,某學生的實驗設(shè)計如下:制備30%新鮮豬肝研磨液;設(shè)置實驗組如下(1):橫向為梯度pH值,縱向為不同量的新鮮豬肝研磨液;每支試管加入等量且足量H2O2溶液,并設(shè)置相同且適宜的反應(yīng)溫度;設(shè)計實驗記錄表如下(2);以加入豬肝研磨液后同等時間內(nèi)測得的H2O2減少量為實驗結(jié)果作記錄。下列實驗結(jié)果預(yù)測及其分析,不正確的是( )

A. 無論豬肝研磨液量為圖中何值,實驗結(jié)果都可以發(fā)現(xiàn)酶的最適pH

B. 無論pH為圖中何值,實驗結(jié)果都可以證明酶量影響反應(yīng)速率

C. 無論豬肝研磨液量為圖中何值,記錄表中作出的曲線圖形都近似拋物線

D. 此實驗有2個自變量,1個因變量,溫度、H2O2濃度等是無關(guān)變量

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【題目】黃色小鼠(AA)與黑色小鼠(aa)雜交,產(chǎn)生的F1(Aa)不同個體出現(xiàn)了不同體色。研究表明,不同體色的小鼠A基因的堿基序列相同,但A基因上二核苷酸(CpG)胞嘧啶有不同程度的甲基化(如圖)現(xiàn)象出現(xiàn),甲基化不影響基因DNA復(fù)制。有關(guān)分析錯誤的是

A. F1個體體色的差異與A基因甲基化程度有關(guān)

B. 甲基化可能影響RNA聚合酶與該基因的結(jié)合

C. 堿基甲基化不影響堿基互補配對過程

D. 甲基化是引起基因突變的常見方式

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【題目】如圖是一個涉及甲、乙兩種單基因遺傳病的家系圖,其中Ⅱ-3不攜帶乙病基因。不考慮染色體畸變和基因突變。下列敘述正確的是

A.乙病是常染色體隱性遺傳病B.-2為雜合子的概率為2/3

C.-1攜帶致病基因的概率是4/5D.-3X染色體可能來自于Ⅰ-2

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【題目】下丘腦在人體生命活動中有重要的作用,如圖所示,下列分析不正確的是(

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C.c引起下丘腦分泌③胰高血糖素D.d引起下丘腦產(chǎn)生④電位變化

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【題目】選取長度相同的幼苗,實驗裝置如圖甲所示,給予光照 在不同時間測定幼苗伸長的長度,結(jié)果如圖乙。能正確表 示對照組、實驗組向光側(cè)和背光側(cè)幼苗伸長長度的曲線依次是

A. ①②③B. ②③①C. ③②①D. ②①③

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