Question

【題目】牛等牲畜的瘤胃中生活著許多以尿素作唯一氮源的微生物。某同學從剛宰殺的牛的瘤胃中取樣,獲得菌液,并對能分解尿素的細菌進行分離、計數(shù)和鑒定�；卮鹣铝袉栴}：

（1）為從混雜的菌液中分離菌種，常用 和 方法，在固體培養(yǎng)基上接種，使細菌在固體培養(yǎng)基上形成單個 ，從而獲得純菌株。

（2）為了測定細菌含量，將稀釋度為103與104的菌液均按O．lmL的用量，各接種3個平板,在無氧條件培養(yǎng)一段時間后，103的稀釋度下平板上長出的菌落數(shù)分別為45、56、37，而104的稀釋度下平板上長出的菌落數(shù)分別為26、14、17，則每升菌液的活菌數(shù)約為 。與活菌的實際數(shù)目相比，該方法測得的結(jié)果往往偏低，主要原因是 。

（3）為了鑒定該菌種,在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基需添加 作指示劑，目的菌在生長過程中會產(chǎn)生 酶，催化尿素分解并產(chǎn)生NH3,使pH升高,指示劑變紅。

Answer 1

【答案】（1）平板劃線法 稀釋涂布平板法 菌落

（2）4．6×108個 兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

（3）酚紅 腺

【解析】（1）分離微生物的常用方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。兩種方法的目的都是使細菌在固體培養(yǎng)基上形成單個菌落，從而獲得純菌株。

（2）104的稀釋度下，三個平板上的菌落數(shù)都小于30，說明實驗過程出現(xiàn)問題。因此該菌落數(shù)用稀釋度為103來計算。（45+56+37）÷3÷0．1×1000=4．6×105個，每升水樣中的活菌數(shù)為4．6×105×103=4．6×108．該方法測得的結(jié)果往往偏低，主要原因是兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

（3）尿素分解菌可以產(chǎn)生脲酶將尿素分解分解為氨，使pH升高，培養(yǎng)基中進入酚紅指示劑后，氨可以使指示劑呈紅色，據(jù)此可以用酚紅指示劑鑒別尿素分解菌．