13.科學家將人的生長素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達.過程如下圖,據(jù)圖回答:
(1)過程(1)表示的是采取反轉錄法來獲取目的基因.
(2)圖中(1)過程是以生長素的RNA為模板,逆轉錄形成DNA單鏈,再進一步合成DNA雙鏈.
(3)圖中(2)所示為重組質(zhì)粒,它含有目的基因.
(4)圖中(3)過程用人工方法,使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞內(nèi),主要是借鑒細菌或病毒侵染細菌的途徑.一般將受體大腸桿菌用CaCl2處理,以增大細胞壁的通透性,使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進入受體細胞.

分析 分析題圖:圖示是將人的生長素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達的過程.圖中(1)表示采用人工合成法合成目的基因(生長素基因);(2)為基因表達載體;(3)表示將目的基因導入受體細胞.

解答 解:(1)由圖可知,過程(1)表示以生長素的RNA為模板逆轉錄合成目的基因.
(2)圖中(1)過程是以生長素的RNA為模板,逆轉錄形成DNA單鏈,再進一步合成DNA雙鏈.
(3)圖中(2)所示為重組質(zhì)粒(基因表達載體),它含有目的基因.
(4)圖中(3)是將目的基因導入受體細胞的過程,利用了細菌或病毒天然的侵染 能力,當受體細胞是微生物細胞是,常采用感受態(tài)細胞法,即用Ca2+處理微生物細胞,以增大細胞壁的通透性,使細胞成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細胞.
故答案為:
(1)逆轉錄法
(2)生長素的RNA   逆轉錄
(3)重組質(zhì)粒
(4)侵染   CaCl2 細胞壁

點評 本題結合轉基因大腸桿菌的培育過程圖,考查基因工程的相關知識,要求考生識記基因工程的工具及作用;識記基因工程的操作步驟及各步驟采用的方法和注意事項,能結合圖中信息答題.

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若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞.從隱形純合子中分離出圖1及其對應的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,產(chǎn)物中共有2種不同長度的DNA片段.
(2)為了提高試驗成功率,需要通過PCR技術擴增目的基因,以獲得目的基因的大量拷貝.該方法也是檢測遺傳(基因)多樣性的最簡單方法.
(3)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應選用的限制酶是BamH1.
(4)為了篩選出成功導入含目的基因D的重組質(zhì)粒的大腸桿菌,首先將大腸桿菌在含抗生素B的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖3的菌落.再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含抗生素A的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖4的結果(空圈表示與圖3對照無菌落的位置).
(5)在選出的大腸桿菌內(nèi)基因D能成功表達的原因是生物界共用一套遺傳密碼子.其表達產(chǎn)物是一條多肽鏈,如考慮終止密碼,則其至少含有的氧原子數(shù)為340.

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