6.在“DNA的粗提取和鑒定”實驗中,發(fā)現(xiàn)DNA提取量不足.下列有關(guān)原因分析不正確的是(  )
A.經(jīng)蒸餾水處理的紅細胞用玻璃棒攪拌的時間過短
B.溶解時所調(diào)制的NaCl溶液濃度未達到2mol/L
C.DNA再溶解時,玻璃棒攪拌方向是單向的
D.向2mol/LNaCl溶液中加入蒸餾水太少

分析 1、DNA粗提取和鑒定的原理:
(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性.
(2)DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍色.
2、DNA粗提取和鑒定的過程:
(1)實驗材料的選。悍彩呛蠨NA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大.
(2)破碎細胞,獲取含DNA的濾液:
動物細胞的破碎比較容易,以雞血細胞為例,在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可.如果實驗材料是植物細胞,需要先用洗滌劑溶解細胞膜.例如,提取洋蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液.
(3)去除濾液中的雜質(zhì):
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同.
方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離.
(4)DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA.用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分.
②取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解.然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑.混合均勻后,將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變藍.

解答 解:A、經(jīng)蒸餾水處理的紅細胞用玻璃棒攪拌的時間過短,部分細胞還未破裂,這會造成DNA的提取量不足,A正確;
B、NaCl溶液濃度在0.14~2mol/L時,隨著NaCl溶液濃度的升高,DNA的溶解度越大,因此溶解時所調(diào)制的NaCl溶液濃度未達到2mol/L時,部分DNA還沒有溶解,這會造成DNA的提取量不足,B正確;
C、DNA再溶解時,玻璃棒應該沿著一個方向緩慢攪拌,這不會造成DNA提取量不足,C錯誤;
D、向2mol/LNaCl溶液中加入蒸餾水的目的是稀釋溶液,使DNA析出,若加入蒸餾水的量太少,稀釋度不夠,這會造成DNA的提取量不足,D正確.
故選:C.

點評 本題考查DNA的粗提取和鑒定,對于此類試題,需要考生注意的細節(jié)較多,如實驗的原理、實驗采用的方法、實驗現(xiàn)象等,需要考生在平時的學習過程中注意積累.

練習冊系列答案
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(2)方法二:科學家從細胞中分離出無限增殖基因(prG),可將prG基因?qū)肽墚a(chǎn)生抗EBOV抗體的小鼠漿細胞中,導入prG基因的漿細胞具有既能無限增殖,又能產(chǎn)生抗EBOV的(特異性或?qū)R恍曰蛩璧模┛贵w的特點.
(3)以上兩種方法獲得的雜交瘤細胞或帶有prG基因的漿細胞,可在無菌、無毒的環(huán)境、營養(yǎng)、適宜的溫度和pH和一定的氣體環(huán)境等條件下進行體外培養(yǎng),以便源源不斷的產(chǎn)生抗EBOV的單克隆抗體.
(4)方法二中,若用PCR擴增方法獲取目的基因,則需要用到耐高溫的DNA聚合(或“Taq”)酶,該方法能夠成功獲取目的基因的前提是要有一段已知的目的基因核苷酸序列,以便合成引物.

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