Question

12．轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用使生物界產(chǎn)生了許多新的生物類型，完成了多種生物性狀的定向改變，如利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育高血壓大鼠，研究其致病機理及治療藥物的選擇；將鐵結(jié)合蛋白質(zhì)導(dǎo)入高產(chǎn)水稻中，獲得高產(chǎn)、含鐵量高的水稻株系等．請回答下列問題：
（1）轉(zhuǎn)基因生物的培育的首要條件是先獲得目的基因，常用PCR（多聚酶鏈式反應(yīng)）技術(shù)在體外大量擴增；構(gòu)建基因表達載體時需要的工具酶有限制酶和DNA連接酶，基因表達載體中標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，將含有目的基因的細胞篩選出來．
（2）在轉(zhuǎn)基因動物的培育過程中，將目的基因?qū)�入受精卵采用最多的方法是顯微注射技術(shù)，體外培養(yǎng)受精卵時，培養(yǎng)液中提供CO₂的目的是維持培養(yǎng)液的pH．若將得到的胚胎進行分割，其操作過程中特別需要注意的問題是將內(nèi)細胞團均等分割．
（3）植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素的比例影響細胞發(fā)育的方向．

Answer 1

分析 植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化兩個重要的過程，決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要．生長素和細胞分裂素的使用比例不同，培養(yǎng)的結(jié)果不同．生長素和細胞分裂素的比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時，促進愈傷組織的生長．

解答 解：（1）PCR技術(shù)可在體外大量擴增目的基因．構(gòu)建基因表達載體的過程需要的工具酶是限制酶和DNA連接酶．標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素基因．
（2）受體細胞是動物細胞時，常用顯微注射法將目的基因?qū)�入動物細胞．培養(yǎng)液中提供CO₂的目的是維持培養(yǎng)液的pH．胚胎分割過程中，特別需要注意將內(nèi)細胞團均等分割，以防影響胚胎的正常發(fā)育．
（3）生長素和細胞分裂素的使用比例不同，培養(yǎng)的結(jié)果不同．生長素和細胞分裂素的比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時，促進愈傷組織的生長．
故答案為：
（1）PCR（多聚酶鏈式反應(yīng)）     限制酶和DNA連接酶  鑒別受體細胞中是否含有目的基因，將含有目的基因的細胞篩選出來
（2）顯微注射技術(shù)   維持培養(yǎng)液的pH  將內(nèi)細胞團均等分割
（3）生長素   細胞分裂素

點評 本題考查植物組織培養(yǎng)、基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運用所學(xué)知識，解決生物學(xué)問題和得出正確結(jié)論的能力．