Question

9．恒化器是微生物連續(xù)培養(yǎng)時使用的大型容器，容器中一部分舊的培養(yǎng)基以一定的速度流出，同時不斷有等量的新鮮培養(yǎng)基流入以保證微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要．研究人員將大腸桿菌JA122菌株接種到葡萄糖含量受到限制的培養(yǎng)基中，在恒化器內(nèi)連續(xù)培養(yǎng)773代，然后取樣分析其中存在的新菌株．請回答下列問題：
（1）用于連續(xù)培養(yǎng)JA122大腸桿菌的培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基．培養(yǎng)基中除了含葡萄糖作為碳源外，還應(yīng)該含有氮源、水、無機(jī)鹽．
（2）對三種菌株的代謝差異進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，CV103對葡萄糖吸收率最高，代謝終產(chǎn)物是醋酸鹽．進(jìn)一步研究表明，CV101可以在過濾的培養(yǎng)過CV103的培養(yǎng)基中生長，反過來CV103不能在過濾的培養(yǎng)過CV101的培養(yǎng)基中生長，據(jù)此作出的推測是：CV101菌株能以CV103菌株產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源．請設(shè)計并完成下列實驗步驟，來驗證你的觀點．
①配制CV101以CV103產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源的培養(yǎng)基；
②將CV101和CV103菌株分別接種到新配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間，并觀察記錄菌株的生長情況．
③預(yù)期實驗結(jié)果：以醋酸鹽為唯一碳源 CV101能生長、CV103不能生長．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）由題意可知，連續(xù)培養(yǎng)的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基；培養(yǎng)基的基本營養(yǎng)成分包括碳源、氮源、水、無機(jī)鹽，其中葡萄糖作為碳源．
（2）由題意可知，CV103對葡萄糖吸收率最高，代謝終產(chǎn)物是醋酸鹽，CV101可以在過濾的培養(yǎng)過CV103的培養(yǎng)基中生長，由此可以推出CV101菌株能以CV103菌株產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源．若要驗證CV101菌株能以CV103菌株產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源這一推論，就要配制以醋酸鹽為唯一碳源的培養(yǎng)基，將CV101和CV103菌株分別接種到新配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間，并觀察記錄菌株的生長情況，如果CV101菌株能生長，CV103菌株不能生長，則說明推論是正確的．
故答案為：
（1）液體培養(yǎng)基     碳源         氮源、水、無機(jī)鹽
（2）CV101菌株能以CV103菌株產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源     
①CV101以CV103產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源
③CV101能生長、CV103不能生長

點評 本題考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的基本成分、種類及功能；識記接種微生物常用的兩種方法，再根據(jù)題干信息準(zhǔn)確答題．