Question

8．請回答下列問題．
（1）進行菊花的組織培養(yǎng)，除要提供適宜的營養(yǎng)物質(zhì)和激素外，還要控制適宜的pH、溫度、光照等條件．
（2）為了調(diào)查南充市西河的水質(zhì)狀況，某興趣小組決定測定該河流水樣中的細菌含量，并對細菌進行分離．
①該小組采用涂布法檢測水樣中的細菌含量．將1mL水樣稀釋100倍，在3個培養(yǎng)基上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個培養(yǎng)基上的菌落數(shù)分別為39、38、和37．此可得出每升水樣中的活菌數(shù)約為3.8×10⁷個，這樣統(tǒng)計的活菌數(shù)往往比實際數(shù)目低，因為因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．同時取若干滅菌后的空白培養(yǎng)基一起培養(yǎng)，這樣做的目的是作為對照，檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格（排除培養(yǎng)基滅菌不徹底或培養(yǎng)過程中雜菌污染）．
②該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)．結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快．其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中溶解氧（氧氣）的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．
2、計算樣品菌液中的菌株數(shù)時，每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表樣品菌液的稀釋倍數(shù)．

解答 解：（1）植物組織培養(yǎng)技術(shù)的培養(yǎng)條件：①在無菌條件下進行人工操作．②保證水、無機鹽、碳源（常用蔗糖）、氮源（含氮有機物）、生長因子（維生素）等營養(yǎng)物質(zhì)的供應．③需要添加一些植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，主要是生長素和細胞分裂素．④愈傷組織再分化到一定階段，形成葉綠體，能進行光合作用，故需光照．
（2）①由題意知，平板上生長的平均菌落數(shù)=（39+38+37）÷3=38個，則1ml水樣中的菌落數(shù)=（C÷V）×M=（38÷0.1）×100=3.8×10⁴個，每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×10⁴×10³=3.8×10⁷個．由于當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此這樣統(tǒng)計的活菌數(shù)目往往比實際數(shù)目低；微生物培養(yǎng)過程應該進行無菌操作，配制的培養(yǎng)基要進行高壓蒸汽滅菌，該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量，在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是：作為對照，檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格． 
②振蕩培養(yǎng)比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快，由此可以說明該細菌是需要菌，由于振蕩培養(yǎng)提高了培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，這樣提高了營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，使細菌生長速度加快．
故答案為：
（1）pH    溫度   光照
（2）①3.8×10⁷     低   因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落       作為對照，檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格（排除培養(yǎng)基滅菌不徹底或培養(yǎng)過程中雜菌污染）
②溶解氧 （氧氣）     營養(yǎng)物質(zhì)

點評 本題的知識點是植物組織的培養(yǎng)、微生物的分離和培養(yǎng)，主要考查學生對相關(guān)基礎(chǔ)知識的掌握與綜合運用能力．