Question

【題目】如圖所示為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖。請回答以下問題：

（1）圖中①過程用到的工具酶的特點是_________________________________。下列所示的黏性末端是由_______種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的。

（2）圖中②過程用到的工具酶是___________，該過程是基因工程最核心的步驟，即____________。

（3）圖中④過程的原理是___________。

（4）檢驗基因工程是否成功。首先應檢測___________，這是外源基因能否在真核細胞內(nèi)___________的關鍵；其次，利用___________法檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應的mRNA；最后，利用抗原一抗體雜交法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。

Answer 1

【答案】能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點切割DNA分子4DNA連接酶基因表達載體的構建植物細胞的全能性轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入外源基因穩(wěn)定遺傳分子雜交

【解析】

（1）圖中①過程所用的酶為限制酶，其特點是能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點切割DNA分子。圖中四個黏性末端各不相同，根據(jù)限制酶的特異性可知，這四種黏性末端是由四種不同的限制酶切割形成的。

（2）圖中②過程是將黏性末端連接，形成重組質(zhì)粒，需要DNA連接酶，基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建。

（3）圖中④過程是利用植物組織培養(yǎng)將外植體培養(yǎng)成植株的過程，原理是植物細胞具有全能性。

（4）基因工程是否成功,需要進行檢測，其中分子水平的檢測：第一步:轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，方法:DNA分子雜交技術，這是看外源基因能否在真核細胞內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關鍵，第二步:目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法:分子雜交技術，第三步:目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法:從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應的抗體進行抗原-抗體雜交。