Question

科研人員想研究“在胰島素使用總量不變的前提下，胰島素使用次數(shù)對(duì)同一組織不同細(xì)胞株克隆效率的影響”．請(qǐng)完成實(shí)驗(yàn)思路，并分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果．
實(shí)驗(yàn)材料：M濃度胰島素溶液（小鼠血漿晝夜平均胰島素濃度）、培養(yǎng)液、小鼠皮膚生發(fā)層組織（能增殖）、胰蛋白酶、3種抗體、生理鹽水等．（要求與說(shuō)明：答題時(shí)不考慮加入胰島素溶液后的培養(yǎng)液體積變化等誤差；不同濃度的胰島素溶液加入細(xì)胞培養(yǎng)液的間隔時(shí)間為24小時(shí)；抗體能識(shí)別特定的膜蛋白質(zhì)，但不損傷細(xì)胞）
（1）實(shí)驗(yàn)思路：
①向有小鼠皮膚生發(fā)層組織的培養(yǎng)液中加入

 

獲得單細(xì)胞懸浮液，再轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液中進(jìn)行原代培養(yǎng)，然后將其分成3瓶，并在每瓶中加入

 

從而獲取3種特殊細(xì)胞，分別命名為細(xì)胞株1、2、3．
②將M濃度胰島素溶液分別稀釋到原濃度的

1

2

、

1

3

，備用．
③實(shí)驗(yàn)分組及操作．若實(shí)驗(yàn)在適宜條件下進(jìn)行72小時(shí)，以細(xì)胞株1為例，將細(xì)胞株1均分為3份實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完成表格．

細(xì)胞株類型	胰島素濃度	加入胰島素次數(shù)	檢測(cè)內(nèi)容
細(xì)胞株1

（2）實(shí)驗(yàn)分析：
①本實(shí)驗(yàn)用克隆化細(xì)胞株而不是原代培養(yǎng)物作實(shí)驗(yàn)材料，原因是克隆化細(xì)胞株中的細(xì)胞具有

 

 的特點(diǎn)，這樣可以減少實(shí)驗(yàn)誤差．
②按照上述實(shí)驗(yàn)操作，可能還會(huì)產(chǎn)生一定的誤差，改進(jìn)的辦法是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程

專題：

分析：實(shí)驗(yàn)的目的是為了研究在胰島素使用總量不變的前提下，胰島素使用次數(shù)對(duì)同一組織不同細(xì)胞株克隆效率的影響．根據(jù)實(shí)驗(yàn)的對(duì)照原則和單一變量原則，將M濃度胰島素溶液分別稀釋到原濃度的

1

2

、

1

3

，則胰島素濃度為M，加1次胰島素；胰島素濃度為

M

2

，分2次加胰島素；胰島素濃度為

M

3

，分3次加胰島素．克隆化細(xì)胞株中的細(xì)胞具有遺傳物質(zhì)均一，表現(xiàn)性狀相似的特點(diǎn)，這樣可以減少實(shí)驗(yàn)誤差．重復(fù)實(shí)驗(yàn)，求平均值，可以減少實(shí)驗(yàn)偶然因素引起的誤差．

解答： 解：（1）①腫瘤組織的細(xì)胞之間有一些蛋白質(zhì)類物質(zhì)，根據(jù)酶的專一性，培養(yǎng)之前，腫瘤組織必須先用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）等處理成單個(gè)細(xì)胞．獲得單細(xì)胞懸浮液后，再轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液中進(jìn)行原代培養(yǎng)，然后將其分成3瓶，并在每瓶中加入一種抗體從而獲取3種特殊細(xì)胞，分別命名為細(xì)胞株1、2、3．③實(shí)驗(yàn)的目的是為了研究在胰島素使用總量不變的前提下，胰島素使用次數(shù)對(duì)同一組織不同細(xì)胞株克隆效率的影響．因此胰島素濃度為M，加1次胰島素；胰島素濃度為

M

2

，分2次加胰島素；胰島素濃度為

M

3

，分3次加胰島素．培養(yǎng)30小時(shí)后，檢測(cè)每培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞數(shù)量．
（2）①克隆化細(xì)胞株中的細(xì)胞具有遺傳物質(zhì)均一，表現(xiàn)性狀相似（或同質(zhì)性/生理特征相同）的特點(diǎn)，這樣可以減少實(shí)驗(yàn)誤差．因此本實(shí)驗(yàn)用克隆化細(xì)胞株而不是原代培養(yǎng)物作實(shí)驗(yàn)材料．
②上述實(shí)驗(yàn)操作中，還可以改進(jìn)的辦法是每個(gè)實(shí)驗(yàn)組再增加若干個(gè)樣品（或重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)步驟若干次），求平均細(xì)胞總數(shù)，減少實(shí)驗(yàn)偶然因素引起的誤差．
故答案為：
（1）①胰蛋白酶         一種抗體
③

（2）①遺傳物質(zhì)均一，表現(xiàn)性狀相似（或同質(zhì)性/生理特征相同）
②每個(gè)實(shí)驗(yàn)組再增加若干個(gè)樣品（或重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)步驟若干次），求平均細(xì)胞總數(shù)

點(diǎn)評(píng)：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程及應(yīng)用、探究實(shí)驗(yàn)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；具有對(duì)一些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行初步探究的能力，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理．