Question

10．如表是篩選異養(yǎng)型細(xì)菌的培養(yǎng)基配方．

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
FeCl3	0.1g
X	1g
維生素	微量
瓊脂	15g
將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到100mL

（1）苯胺是致癌物質(zhì)，土壤中有分解苯胺的異養(yǎng)型細(xì)菌，此培養(yǎng)基中的成分X除為目的菌提供能源外，還能提供碳源、氮源，該培養(yǎng)基從作用看屬于選擇培養(yǎng)基．制備固體培養(yǎng)基時(shí)調(diào)節(jié)pH在融化步驟后．
（2）如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，則獲得圖乙效果的接種方法是平板劃線法．運(yùn)用圖甲所示接種方法統(tǒng)計(jì)的菌落常常比活菌的實(shí)際數(shù)目偏低．其理由是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落．
（3）運(yùn)用圖丙方法計(jì)數(shù)時(shí)，已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由25×16個(gè)小格組成，容納液體的總體積為0.4mm³，觀察到圖中計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個(gè)中格共有目的菌80個(gè)，則1mL樣液中約有目的菌10⁶個(gè)．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）培養(yǎng)基的基本成分包括水、無機(jī)鹽、碳源和氮源，因此此培養(yǎng)基中的成分X除為目的菌提供能源外，還能提供碳源、氮源；該培養(yǎng)基以苯胺為唯一碳源和氮源，因此該培養(yǎng)基從作用看屬于選擇培養(yǎng)基．制備固體培養(yǎng)基的步驟為：計(jì)算、稱量、融合、調(diào)pH、滅菌和倒平板．
（2）接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖甲采用的稀釋涂布平板法，圖乙采用的是平板劃線法．由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此運(yùn)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落常常比活菌的實(shí)際數(shù)目偏低．
（3）運(yùn)用圖丙方法計(jì)數(shù)時(shí)，已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由25×16個(gè)小格組成，容納液體的總體積為0.4mm³，觀察到圖中計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個(gè)中格共有目的菌80個(gè)，則1mL樣液中約有目的菌80×$\frac{25}{5}$×$\frac{1000}{0.4}$=10⁶個(gè)．
故答案為：
（1）碳源、氮源        選擇     融化
（2）平板劃線法    偏低   當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落
（3）10⁶

點(diǎn)評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、種類及功能；識記接種微生物常用的兩種方法；識記計(jì)數(shù)微生物常用的方法及注意事項(xiàng)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．