Question

5．應(yīng)用生物工程技術(shù)可以獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品．請(qǐng)回答下列有關(guān)生物工程的問題．
（1）基因工程中構(gòu)建基因表達(dá)載體需要用到限制酶酶和DNA連接酶，DNA連接酶中，T₄DNA連接酶可連接DNA的兩個(gè)末端．
（2）大腸桿菌PUC19質(zhì)粒如圖所示．
Lacz基因是PUC19質(zhì)粒上重要的標(biāo)記基因，其表達(dá)產(chǎn)物能水解X-gal，進(jìn)而使大腸桿菌菌落呈藍(lán)色．用EcoRl構(gòu)建重組質(zhì)粒，導(dǎo)入受體菌（不含LacZ基因和氨卡青霉素抗體基因）并進(jìn)行檢測(cè)．下列敘述不正確的是D（單選）
A．應(yīng)用涂布法將受體菌群接種在培養(yǎng)基表面
B．培養(yǎng)基中應(yīng)含有氨卡青霉素和X-gal
C．挑取菌落的接種環(huán)在操作前后都應(yīng)該灼燒滅菌
D．應(yīng)挑取培養(yǎng)基表面的藍(lán)色菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)
（3）植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，最常用的導(dǎo)入目的基因的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其中需要的運(yùn)載體是Ti質(zhì)粒，目的基因插入到該運(yùn)載體的T-DNA中，以便使植物細(xì)胞得以轉(zhuǎn)化．這是雙子葉植物和裸子植物常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法．
（4）動(dòng)物基因工程中，一般把目的基因?qū)�入�?dòng)物的受精卵細(xì)胞中．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本工具：分子手術(shù)刀”--限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、“分子縫合針”--DNA連接酶、“分子運(yùn)輸車”--載體．
2、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④目的基因的檢測(cè)與鑒定．

解答 解：（1）基因工程中構(gòu)建基因表達(dá)載體需要用到限制酶和DNA連接酶，DNA連接酶中，T₄DNA連接酶可連接DNA的兩個(gè)末端．
（2）解：A、篩選與分離工程菌需要用涂布法將受體菌群接種在培養(yǎng)基表面，A正確；
B、根據(jù)題干可知，目的菌能夠在含有氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上生存，所以篩選與分離時(shí)的培養(yǎng)基應(yīng)含有氨芐青霉素和X-gal，B正確；
C、接種時(shí)接種環(huán)應(yīng)該使用灼燒滅菌，C正確；
D、根據(jù)題干可知，受體菌不含LacZ基因和氨芐青霉素抗性基因，不能使大腸桿菌菌落呈藍(lán)色，D錯(cuò)誤．
故選：D．
（3）植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，最常用的導(dǎo)入目的基因的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其中需要的運(yùn)載體是Ti質(zhì)粒，目的基因插入到該運(yùn)載體的T-DNA 中，以便使植物細(xì)胞得以轉(zhuǎn)化．這是雙子葉植物和裸子植物常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法．
（4）動(dòng)物基因工程中，一般把目的基因?qū)�入�?dòng)物的受精卵細(xì)胞中，原因是全能性高，容易表達(dá)．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶 （限制酶） T₄DNA連接酶
（2）D
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法  Ti質(zhì)粒   T-DNA   雙子葉
（4）受精卵

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握基因工程的操作步驟，識(shí)記基因工程的操作工具及作用，能夠結(jié)合圖示以及所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題，難度適中．