Question

【題目】2020年新型冠狀病毒（COVID--19）在全球大爆發(fā)，起人體患病毒性肺炎，該病毒為單鏈RNA病毒。請回答下列問題：

（1）研究表明，RNA酶廣泛存在而穩(wěn)定，RNA制劑中只要存在少量的RNA酶就會引起RNA的降解。病毒核酸檢測是新冠肺炎診治的關(guān)鍵一步，常采用核酸檢測試劑盒（RT-PCR技術(shù)——逆轉(zhuǎn)錄熒光PCR技術(shù)）進行檢測。RT-PCR技術(shù)首先經(jīng)___________酶的作用，以病毒RNA為模板合成___________，再以其為模板，擴增合成目的片段。不直接用病毒RNA進行核酸檢測，而采用RT-PCR技術(shù)的原因是___________。

（2）得到足夠量的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA之后，可用放射性同位素將其標(biāo)記作為探針，利用__________技術(shù)，按照___________原理對待測人員進行核酸檢測。如果顯示出___________，即為陽性。

（3）PCR技術(shù)中使用的Taq酶是來自于溫泉的一種嗜熱菌，該菌能在高溫環(huán)境中生長的特殊本領(lǐng)是由細胞內(nèi)___________直接決定的。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 cDNA 通過擴增反應(yīng)將樣本中微量的病毒信息加以放大 DNA分子雜交 堿基互補配對 雜交帶 Taq酶特定的空間結(jié)構(gòu)

【解析】

RT -PCR即逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)。原理是:提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達。RT-PCR使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數(shù)量級，使一些極為微量RNA樣品分析成為可能。該技術(shù)主要用于:分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構(gòu)建RNA高效轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。

（1）由以上分析可知：RT-PCR技術(shù)首先經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶的作用，以病毒RNA為模板合成cDNA；再以其為模板，擴增合成目的片段（雙鏈DNA）；因樣品中病毒RNA含量較少，故不直接用病毒RNA進行核酸檢測，而采用RT-PCR技術(shù)可通過擴增反應(yīng)將樣本中微量的病毒信息加以放大，故常采用PCR技術(shù)。

（2）用放射性同位素標(biāo)記的探針（能與病毒的互補配對的序列）對疑似患者進行核酸檢測，其檢測方法采用了（DNA）分子雜交技術(shù)；該技術(shù)的原理為堿基互補配對；若探針能與待測人員的核酸出現(xiàn)雜交帶，則證明該患者為陽性。

（3）Taq酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，其（功能）特點是由其特定的空間結(jié)構(gòu)直接決定的。