Question

【題目】利用微生物分解玉米淀粉來生產(chǎn)糖漿具有廣闊的應(yīng)用前景�，F(xiàn)有的野生菌株對玉米淀粉的分解效率低，某同學(xué)嘗試對其進行改造，以獲得高效菌株。請回答下列問題：

（1）實驗步驟：

①配制固體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的碳源應(yīng)為___________；除碳源外，培養(yǎng)基中還應(yīng)包括___________等物質(zhì)。

②用適當強度的紫外線照射野生菌株，其目的是______________________。將經(jīng)照射的野生菌株接種至已滅菌的培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)基的滅菌方法為___________。

③將平板放在適宜條件的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，平板應(yīng)___________（填“正置”或“倒置”）。

④菌落形成后，加入碘液，觀察菌落周圍的透明圈，___________的菌落就為初選菌落。

（2）采用平板劃線法接種時，為獲得單個菌落，在劃線時應(yīng)進行的操作是___________。

（3）選擇出來的細菌經(jīng)擴大培養(yǎng)后需要進行計數(shù)，采用稀釋涂布平板法計數(shù)時是否需要設(shè)置空白對照組？___________；解釋其原因：___________。

Answer 1

【答案】（玉米）淀粉 氮源、水和無機鹽 誘導(dǎo)野生菌株發(fā)生基因突變 高壓蒸汽滅菌法 倒置 透明圈大 在第二次及以后的劃線時，應(yīng)從上一次劃線的末端開始劃線 需要 需要證明（或判斷）培養(yǎng)基是否被雜菌污染（或培養(yǎng)基滅菌是否合格）

【解析】

微生物培養(yǎng)時所用培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)包含碳源、氮源、水和無機鹽，選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的，通常通過氮源、碳源的添加達到選擇效果，選擇培養(yǎng)基中可以加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物或反應(yīng)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而達到找出目的菌菌落并挑選分解能力強的菌落的目的。培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，在滅菌后還應(yīng)該以空白培養(yǎng)基作對照以判斷是否滅菌完全，未被污染。采用平板劃線法分離微生物，在操作時,接種環(huán)通過滅菌,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線，末端劃線就起了稀釋作用。這樣做的目的是為了得到單菌落。

（1）該培養(yǎng)基是為了分離能高效分解淀粉的微生物，故碳源應(yīng)該為（玉米）淀粉。除碳源外，還應(yīng)當加入氮源、水和無機鹽。紫外線照射可以誘導(dǎo)野生菌株發(fā)生基因突變，以獲取所需菌種。培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌法。在培養(yǎng)箱中的平板應(yīng)倒置，以防止皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng)基中造成污染。淀粉遇碘變?yōu)樗{色，能夠分解淀粉的菌落周圍會形成透明圈，故應(yīng)選擇透明圈大的菌落作為初選菌落；

（2）采用平板劃線法接種時，在第二次及以后的劃線時，應(yīng)從上一次劃線的末端開始劃線，這樣可以獲得單個菌落；

（3）用于培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基可能滅菌不合格，被雜菌污染，從而影響計數(shù)結(jié)果，因此，要判斷培養(yǎng)基是否被污染，需要將空白培養(yǎng)基放在相同條件下培養(yǎng)作為對照。