Question

回答有關基因工程的問題：
（1）構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生黏性末端，也可能產生

 

末端．若要在限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產生

 

（相同，不同）黏性末端的限制酶．
（2）利用大腸桿菌生產人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是

 

．在用表達載體轉化大腸桿菌時，常用

 

處理大腸桿菌，以利于表達載體進入；為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用

 

片段作探針與mRNA雜交．
（3）如果要將某目的基因通過農桿菌轉化法導入植物細胞，先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的

 

中，然后用該農桿菌感染植物細胞．
（4）為獲得能大量產生人干擾素的轉基因牛，該基因表達載體應導入的受體細胞是

 

．
（5）在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因常作為標記基因，只有含

 

的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：限制酶主要從原核生物中分離純化出來，能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．形成黏性末端和平末端兩種．
將目的基因導入受體細胞的方法因細胞種類不同而不同，將目的基因導入微生物細胞時，常用CaCl₂處理微生物，使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細胞．
分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．

解答： 解：（1）限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種．若要在限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產生相同黏性末端的限制酶．
（2）啟動子是RNA聚合酶識別和結合的位點，有了它才能驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質．在用表達載體轉化大腸桿菌時，常用Ca²⁺處理大腸桿菌，使大腸桿菌變成感受態(tài)細胞，以利于表達載體進入；為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為DNA分子雜交技術．為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成人胰島素，常用抗原-抗體雜交技術．
（3）如果要將某目的基因通過農桿菌轉化法導入植物細胞，先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的T-DNA中，然后用該農桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的染色體的DNA上．
（4）為獲得能大量產生人干擾素的轉基因牛，該基因表達載體應導入的受體細胞是受精卵．
（5）在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長．
故答案為：
（1）平  相同  
（2）RNA聚合酶識別和結合的部位，有了它才能驅動基因轉錄出mRNA    Ca²⁺  標記的胰島素基因
（3）T-DNA  
（4）受精卵   
（5）卡那霉素抗性基因

點評：本題考查基因工程的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯系的能力；能運用所學知識，對生物學問題作出準確的判斷．