Question

3．科學(xué)家將魚的抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高．回 答下列相關(guān)問題：
（1）在該過程中，研究人員首先獲取目的基因，并采用PCR技術(shù)対目的基因進行擴增，該技術(shù)需要的條件是：引物、Taq酶、原料和模板．
（2）為了在番茄中獲得抗凍蛋白必須將抗凍蛋白基因連接在質(zhì)粒中的啟動子之后．基因工程核心步驟的名稱是基因表達載體的構(gòu)建．
（3）研究人員通常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將魚的抗凍蛋白基因?qū)�入番茄細胞�?nèi)，通常采用抗原-抗體雜交技術(shù)，在分子水平檢測目的基因是否翻譯成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）體外擴增目的基因可采用PCR技術(shù)；該技術(shù)需要的條件是：引物、Taq酶、原料（四種脫氧核苷酸）和模板（DNA的兩條鏈）．
（2）抗凍蛋白是由抗凍蛋白基因表達產(chǎn)生的，而基因表達包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個過程，其中轉(zhuǎn)錄過程需要啟動子啟動．因此，為了在番茄中獲得抗凍蛋白必須將抗凍蛋白基因連接在質(zhì)粒中的啟動子之后．基因工程核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建．
（3）將目的基因?qū)�入植物細胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．在分子水平上檢測目的基因是否翻譯成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，通常采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）PCR       引物   Taq酶    模板
（2）啟動子    基因表達載體的構(gòu)建
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化   抗原-抗體雜交

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記層次的考查．