Question

4．如圖是克隆羊的培育流程圖，根據(jù)所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題．

（1）培育克隆羊時(shí)用到的卵母細(xì)胞可以從屠宰場(chǎng)收集，并在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期．
（2）從供體羊中取上皮細(xì)胞，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，然后進(jìn)行分散培養(yǎng)．整個(gè)過(guò)程必須保證細(xì)胞處于無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境中，所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要與體內(nèi)基本相同．進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或者松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%的空氣和5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．
（3）通過(guò)顯微操作法吸出卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，微型吸管除了將細(xì)胞核吸除外，往往還會(huì)將第一極體一并吸出．
（4）去核的卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞通過(guò)電刺激后融合，供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞，構(gòu)建成重組胚胎，融合后的重組胚胎，需要用物理或化學(xué)的方法進(jìn)行激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程．
（5）用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以?xún)?nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型
（6）將重組胚胎發(fā)育到一定階段，移植到同種的且生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育，最后形成克隆羊．移入的胚胎能夠存活，是因?yàn)榇�孕子宮并不會(huì)對(duì)其發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，同時(shí)能夠與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系．
（7）欲培養(yǎng)高產(chǎn)奶山羊這一優(yōu)良品種，對(duì)移植前的胚胎進(jìn)行性別鑒定時(shí)，宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行鑒定，一般采用SRY-PCR方法，選擇出現(xiàn)陰（填“陽(yáng)”或者“陰”）性反應(yīng)的雌性胚胎進(jìn)行移植．

Answer 1

分析 1、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查．
2、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：
①動(dòng)物發(fā)情排卵后，同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的．這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境．
②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)．這就為胚胎的收集提供了可能．
③受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．這為胚胎在受體的存活提供了可能．
④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過(guò)程中不受影響．
3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．

解答 解：（1）體外受精時(shí)，卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期．
（2）從供體羊中取上皮細(xì)胞，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，然后進(jìn)行分散培養(yǎng)．整個(gè)過(guò)程必須保證細(xì)胞處于的環(huán)境中，所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要與體內(nèi)基本相同．進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或者松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%的空氣和5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．
（3）通過(guò)顯微操作法吸出卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，微型吸管除了將細(xì)胞核吸除外，往往還會(huì)將第一極體一并吸出．
（4）去核的卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞可以通過(guò)電刺激融合，供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞，構(gòu)建成重組胚胎，融合后的重組胚胎，需要用物理或化學(xué)的方法進(jìn)行激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程．
（5）因?yàn)?0代以?xún)?nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞．
（6）將重組胚胎發(fā)育到一定階段，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育，最后形成克隆羊．移入的胚胎能夠存活，是因?yàn)榇�孕子宮并不會(huì)對(duì)其發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，同時(shí)能夠在子宮內(nèi)建立正常的生理和組織聯(lián)系．
（7）欲培養(yǎng)高產(chǎn)奶山羊這一優(yōu)良品種，對(duì)移植前的胚胎進(jìn)行性別鑒定時(shí)，宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行鑒定，一般采用SRY-PCR方法，選擇出現(xiàn)陰性反應(yīng)的雌性胚胎進(jìn)行移植．
故答案為：
（1）減數(shù)第二次分裂中
（2）胰蛋白酶或膠原蛋白酶 無(wú)菌無(wú)毒 95%的空氣和5%CO₂
（3）顯微操作  第一極體  
（4）電刺激 
（5）10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型
（6）生理狀態(tài)  免疫排斥反應(yīng)  生理和組織
（7）滋養(yǎng)層   陰

點(diǎn)評(píng) 本題考查細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件；識(shí)記體外受精的過(guò)程；識(shí)記胚胎移植的基本程序，掌握胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．